[發明專利]來自威克漢姆西弗酵母(WICKERHAMOMYCESCIFERRII)的乙酰轉移酶

有效

• 申請號: 201380018786.3
• 申請日: 2013-03-13
• 公開（公告）號: CN104220592B
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發明（設計）人: S·沙費爾;M·法爾維克;H·安德烈埃;T·克勒;D·沃爾夫;F·特爾費爾德;A·珀奇;E·博爾斯;C·朔爾施
• 申請（專利權）人: 贏創德固賽有限公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司72002
• 代理人: 王健

1.一種分離的核酸，其由選自組A1)到D1)的序列組成

A1)Seq ID No.1所示序列，其中所述序列編碼通過轉移來自3分子的乙酰輔酶A的乙酰殘基而能夠將植物鞘氨醇轉化為三乙酰基植物鞘氨醇的蛋白，

B1)無內含子的序列，其來源于A1)所示序列并與Seq ID No.1所示序列編碼相同的蛋白或肽，

C1)編碼蛋白或肽的序列，所述蛋白或肽由Seq ID No.2所示序列組成并通過轉移來自3分子的乙酰輔酶A的乙酰殘基而能夠將植物鞘氨醇轉化為三乙酰基植物鞘氨醇，

D1)組A1)到C1)之一所示序列的互補序列。

2.一種細胞，其特征在于它已經被遺傳修飾，因此與其野生型相比，它顯示酶E₁的修飾活性，其中酶E₁選自

酶E₁，由Seq ID No.2的多肽序列組成，其中酶E₁的酶活性旨在表示通過轉移來自3分子的乙酰輔酶A的乙酰殘基而將植物鞘氨醇轉化為三乙?；参锴拾贝嫉哪芰?，

任選地，與其野生型相比，所述細胞顯示酶E₁的活性增加。

3.如權利要求2所述的細胞，其特征在于與其野生型相比，它還顯示酶E₂的修飾活性，其中酶E₂選自

酶E₂，由Seq ID No.4的多肽序列組成，其中酶E₂的酶活性旨在表示通過轉移來自1分子的乙酰輔酶A的乙酰殘基而將三乙?；参锴拾贝嫁D化為四乙?；参锴拾贝嫉哪芰Α?/p>

4.如權利要求3所述的細胞，其特征在于與其野生型相比，它顯示酶E₁和E₂中至少一種的活性增加。

5.如權利要求4所述的細胞，其特征在于與其野生型相比，它顯示酶E₁和E₂兩種酶的活性均增加。

6.如權利要求2-5任一項所述的細胞，其特征在于它選自釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)，多型漢 遜酵母(Hansenula polymorpha)，粉狀畢赤酵母(Pichia pastoris)，西弗畢赤酵母(Pichia ciferrii)，解脂耶羅維亞酵母(Yarrowia lipolytica)，白色念珠菌(Candida albicans)，實用假性酵母(Candida utilis)和棉阿舒囊霉(Ashbya gossypii)。

7.如權利要求2-6中至少一項所述的細胞用于生產鞘氨醇堿基和/或鞘脂的用途。

8.一種用于生產鞘氨醇堿基和/或鞘脂的方法，包括如下步驟

a)將權利要求2-6中至少一項所述的細胞與包含碳源的培養基接觸，

b)在使細胞能夠從所述碳源形成鞘氨醇堿基和/或鞘脂的條件下培養細胞，和

c)任選地，分離形成的鞘氨醇堿基和/或鞘脂。

9.一種用于生產N-乙?；咀宀返姆椒ǎㄌ幚聿襟E

A)將酶E₁與包含脂肪族伯胺和乙酰輔酶A的培養基接觸，其中酶E₁選自

酶E₁，由Seq ID No.2的多肽序列組成，其中酶E₁的酶活性旨在表示通過轉移來自乙酰輔酶A的3分子乙酰殘基，將植物鞘氨醇轉化為三乙酰基植物鞘氨醇的能力，

B)任選地，分離形成的乙?；?。

10.如權利要求9所述的方法，將酶E₁和E₂與包含脂肪族伯胺和乙酰輔酶A的培養基接觸，其中酶E₂選自

酶E₂，由Seq ID No.4的多肽序列組成，其中酶E₂的酶活性旨在表示通過轉移來自乙酰輔酶A的1分子乙酰殘基，將三乙?；参锴拾贝嫁D化為四乙酰基植物鞘氨醇的能力。

11.如權利要求9或10所述的方法，其中所述脂肪族伯胺是選自具有6到18個碳原子的那些。

12.如權利要求9或10所述的方法，其中所述脂肪族伯胺是線性的。