[發(fā)明專利]表達(dá)異源腫瘤相關(guān)抗原的腺病毒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380017639.4
• 申請日: 2013-02-01
• 公開（公告）號: CN104271748B9
• 公開（公告）日: 2019-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡安·富埃約-馬加雷托;坎德拉里亞·戈麥斯-曼扎諾;W·K·阿爾弗雷德·揚(yáng);維克托·克拉斯內(nèi)赫;江虹
• 申請（專利權(quán)）人: 得克薩斯州大學(xué)系統(tǒng)董事會(huì)
• 主分類號: C12N15/861
• 分類號: C12N15/861;C07K14/47
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;彭鯤鵬

本發(fā)明涉及用于癌癥治療的腺病毒，其包含一個(gè)或更多個(gè)編碼腫瘤抗原的異源核酸序列，由此所述腺病毒在其表面上表達(dá)所述腫瘤抗原。

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求于2012年2月2日提交的美國臨時(shí)專利申請No.61/594,005的權(quán)益，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

序列表、表格和計(jì)算機(jī)程序列表的說明

序列表以名為SEQ.tx(4KB，2013年2月1日)的文件附于本申請中，并且通過引用并入本文。

背景

1.技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明一般性地涉及腫瘤學(xué)和癌癥治療的領(lǐng)域。更特別地，其涉及免疫原性腺病毒。

II.相關(guān)技術(shù)描述

癌癥仍然是全世界人類發(fā)病率和死亡率的主要原因之一。雖然已經(jīng)利用手術(shù)、化學(xué)療法和放射來治愈(cure)癌癥取得了一些成功，但是仍需要新的策略。在腫瘤細(xì)胞中比在正常細(xì)胞中復(fù)制得更好的病毒已顯示出其作為溶瘤劑(oncolytic agent)的前景。已經(jīng)很好地確立了使用腺病毒進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移和腫瘤溶解的可行性(Kirn，1999；Bischoff等，1996；Wildner等，1999a；Wildner等，1999b；(Sterman等；Hum.Gene Ther.9：1083-1092(1998))。

仍然需要另外的抗癌療法。

發(fā)明內(nèi)容

有復(fù)制能力的腺病毒(replication competent adenovirus)可通過至少四種機(jī)制實(shí)現(xiàn)抗癌治療。第一，腺病毒可啟動(dòng)并完成裂解性感染，從而使細(xì)胞裂解(溶瘤作用)。第二，腺病毒可表達(dá)自殺基因，例如胸苷激酶(HSVtk)基因或胞嘧啶脫氨酶-胸苷激酶融合蛋白(Rogulski等，Clin.Cancer Res.3：2081-2088(1997))，其將增加溶瘤活性。第三，可將施用腺病毒與化學(xué)療法(包括任意藥物治療)或者放射組合以增強(qiáng)各藥劑的溶瘤活性(Nielsen等，Cancer Gene Ther.4：835-846(1997))。最后，病毒可以起免疫刺激劑或者表達(dá)免疫刺激性分子之載體的作用，導(dǎo)致刺激針對腫瘤抗原的特定免疫效應(yīng)細(xì)胞。使用溶瘤作用和免疫刺激的組合策略是特別吸引人的，因?yàn)槠淇赏ㄟ^“疫苗效應(yīng)”提供長期的持久應(yīng)答。因此，在本發(fā)明之前，本領(lǐng)域仍然需要具有對表達(dá)或展示腫瘤相關(guān)抗原之腫瘤細(xì)胞改善選擇性的復(fù)制選擇性腺病毒。

本發(fā)明涉及這樣的腺病毒組合物，其具有整合到腺病毒外殼蛋白中的癌抗原、由腺病毒表達(dá)的癌抗原或者與腺病毒一起遞送的癌抗原。在某些方面中，經(jīng)修飾的外殼蛋白將包含經(jīng)修飾的纖維蛋白(fiber protein)、六鄰體蛋白或pIX蛋白。經(jīng)抗原修飾的腺病毒將從第一復(fù)制周期起呈遞癌抗原，從而使腫瘤環(huán)境中的癌抗原水平升高。腫瘤環(huán)境中抗原水平的升高將刺激針對癌抗原以及針對裂解的腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答。在某些方面中，刺激免疫應(yīng)答與腫瘤細(xì)胞的裂解組合，提供了增加腫瘤消退可能性之增強(qiáng)的抗腫瘤免疫。

嵌合腺病毒外殼蛋白可包含約3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29至約30個(gè)異源氨基酸，所述異源氨基酸插入或代替外殼蛋白氨基酸序列，或者替代地與腺病毒外殼蛋白的C-末端融合。所述腺病毒外殼蛋白可以是纖維蛋白、五鄰體基底蛋白、六鄰體或pIX蛋白。抗原可插入六鄰體高變區(qū)1(人5型腺病毒氨基酸139-167)、纖維蛋白HI環(huán)(人5型腺病毒纖維蛋白(fiber)HI環(huán)氨基酸537-549)中，和/或與蛋白IX(人5型腺病毒蛋白IX氨基酸140)綴合或融合。在某些方面中，所述異源氨基酸通過約3個(gè)氨基酸至約30個(gè)氨基酸(包括其之間的所有值和范圍)的間隔序列與嵌合腺病毒外殼蛋白連接。