[發明專利]體外制備人工牙齒原基的方法和由其獲得的人工牙齒原基

有效

• 申請號: 201380011350.1
• 申請日: 2013-02-20
• 公開（公告）號: CN104271167B
• 公開（公告）日: 2016-10-26
• 發明（設計）人: 羅蘭·勞斯特爾;烏韋·馬爾克斯;詹尼弗·賓德;馬克·羅索夫斯基
• 申請（專利權）人: 羅蘭·勞斯特爾;烏韋·馬爾克斯;詹尼弗·賓德;馬克·羅索夫斯基
• 主分類號: A61L27/38
• 分類號: A61L27/38
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 浦彩華;武晨燕

1.體外制備一種人工牙齒原基的方法，包括以下步驟：

a)提供多個分離的間充質牙髓細胞；以及

b)在多種非貼壁條件下培養這些間充質牙髓細胞以形成代表一種人工牙齒原基的一個細胞聚集體。

2.如權利要求1所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞包含或組成為原代成體間充質牙髓細胞。

3.如權利要求1或2中一項所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞源自一顆牙齒的牙髓組織，優選地源自一顆第三磨牙的髓組織。

4.如以上權利要求中一項所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞在每ml5×10⁴到5×10⁷個的一種濃度下經受多種非貼壁培養條件。

5.如以上權利要求中一項所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞在多種非貼壁條件下培養至少48小時。

6.如以上權利要求中一項所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞是在多種非貼壁條件下培養，至少直到形成具有0.3mm到2mm的一種平均直徑的一個細胞聚集體。

7.如以上權利要求中一項所述的方法，其中這些間充質牙髓細胞是在多種非貼壁條件下培養，至少直到所形成的該細胞聚集體展現與即將經受多種非貼壁培養條件之前的分離的間充質牙髓細胞相比，BMP4、HGF、PAX9、MSX1、I型膠原蛋白、DSPP和/或原牙質的上調的表達。

8.如以上權利要求中一項所述的方法，其中在該細胞聚集體的形成中未使用人工生物或非生物支架。

9.如以上權利要求中一項所述的方法，其中在這些間充質牙髓細胞在多種非貼壁條件下培養至少2天之后，添加多個上皮細胞且在多種非貼壁條件下共培養。

10.如權利要求9所述的方法，其中這些上皮細胞是多個角化細胞，優選地是源自皮膚或齒齦的多個角化細胞。

11.通過如權利要求1到10中一項所述的方法生產的人工牙齒原基。

12.包含如權利要求11所述的人工牙齒原基的移植物。

13.包含如權利要求11所述的人工牙齒原基或如權利要求12所述的移植物以及至少一種藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。

14.一種用于體外篩選多種物質的方法，這些物質調節牙齒組織的特性，該方法包括以下步驟：

-提供如權利要求11所述的人工牙齒原基或由其衍生的一個細胞聚集體或組織的一個樣品；

-將該對應的樣品分成多個部分；

-將至少一個部分與待篩選的一種物質一起孵育；以及

-將針對這一被處理的部分所測量的多個參數與未與這一待篩選的物質一起孵育的另一部分相比較。

15.如權利要求14所述的方法，其中在將該部分與待篩選的一種物質一起孵育之前，該部分經受一種自含式循環系統。