[發(fā)明專(zhuān)利]用于傳染性皮下及造血器官壞死病毒的實(shí)時(shí)病毒檢測(cè)方法和試劑盒無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201380011125.8 | 申請(qǐng)日： | 2013-01-15 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN104204231A | 公開(kāi)（公告）日： | 2014-12-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蘇巴·A/P·巴哈蘇;諾芬娜·雅士明·賓蒂奧斯曼;華朋·楚;徒雷·昆 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 馬來(lái)亞大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12Q1/70 | 分類(lèi)號(hào)： | C12Q1/70 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281 | 代理人： | 彭家恩;彭愿潔 |
| 地址： | 馬來(lái)西*** | 國(guó)省代碼： | 馬來(lái)西亞;MY |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 傳染性 皮下 造血 器官 壞死 病毒 實(shí)時(shí) 檢測(cè) 方法 試劑盒 | ||
1.?一種用于定量檢測(cè)生物樣品中傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）的方法，包括：
獲得如SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列的引物對(duì)，和如SEQ?ID?NO：3所示的核苷酸序列的熒光探針；
使用所述引物對(duì)和所述熒光探針，通過(guò)實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增生物樣品中所述病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)；以及
參照陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒，確定所述生物樣品中所述病毒的存在和數(shù)量。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物樣品是DNA或cDNA模板。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物樣品來(lái)源于從不同生長(zhǎng)環(huán)境中收集到的不同發(fā)育期的水生動(dòng)物的組織或整個(gè)生物體。
4.?根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述水生動(dòng)物是羅氏沼蝦（Macrobrachium?resenbergii）蝦種。
5.?根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述不同發(fā)育期包括成年、幼年和幼蟲(chóng)期。
6.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述引物對(duì)和熒光探針是由IHHNV基因組的非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)(ORF1)設(shè)計(jì)的。
7.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述熒光探針被合成為在其5'末端帶有報(bào)告熒光染料并在其3'末端帶有非熒光淬滅劑。
8.?根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述報(bào)告熒光染料是5-羧基熒光素（FAM）。
9.?根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述非熒光淬滅劑是小溝結(jié)合物（MGB）。
10.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒是從用IHHNV基因組的389bp區(qū)域克隆的載體轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞中得到的。
11.?一對(duì)用于基于實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）定量檢測(cè)生物樣品中傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）的引物對(duì)，包括如SEQ?ID?NO:?1和SEQ?ID?NO:?2所示的核苷酸序列。
12.?根據(jù)權(quán)利要求11所述的引物對(duì)，其特征在于，所述引物對(duì)設(shè)計(jì)成特異性識(shí)別和擴(kuò)增IHHNV基因組中一個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)的保守的開(kāi)放閱讀框（ORF1）。
13.?一種用于基于實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）定量檢測(cè)生物樣品中傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）的熒光探針，包括如SEQ?ID?NO:?3所示的核苷酸序列。
14.?根據(jù)權(quán)利要求13所述的熒光探針，其特征在于，所述熒光探針設(shè)計(jì)成特異性識(shí)別和擴(kuò)增IHHNV基因組中一個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)的保守的開(kāi)放閱讀框（ORF1）。
15.?根據(jù)權(quán)利要求13所述的熒光探針，其特征在于，在其5'末端具有報(bào)道熒光染料并在其3'末端具有非熒光淬滅劑。
16.?根據(jù)權(quán)利要求15所述的熒光探針，其特征在于，所述報(bào)告熒光染料是5-羧基熒光素（FAM）。
17.?根據(jù)權(quán)利要求15所述的熒光探針，其特征在于，所述非熒光淬滅劑是小溝結(jié)合物（MGB）。
18.?一種用于定量檢測(cè)生物樣品中傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）的基于實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的擴(kuò)增試劑盒，包括：
引物對(duì)，具有如SEQ?ID?NO:?1和SEQ?ID?NO:?2所示的核苷酸序列；和
熒光探針，具有如SEQ?ID?NO:?3所示的核苷酸序列；以及
PCR預(yù)混合物。
19.?根據(jù)權(quán)利要求18所述的基于實(shí)時(shí)PCR的擴(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述引物對(duì)和熒光探針設(shè)計(jì)成特異性識(shí)別和擴(kuò)增IHHNV基因組中一個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)的保守的開(kāi)放閱讀框（ORF1）。
20.?根據(jù)權(quán)利要求18所述的基于實(shí)時(shí)PCR的擴(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述熒光探針在其5'末端具有報(bào)道熒光染料并在其3'末端具有非熒光淬滅劑。
21.?根據(jù)權(quán)利要求18所述的基于實(shí)時(shí)PCR的擴(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述報(bào)告熒光染料是5-羧基熒光素（FAM）。
22.?根據(jù)權(quán)利要求18所述的基于實(shí)時(shí)PCR的擴(kuò)增試劑盒，其特征在于，所述非熒光淬滅劑是小溝結(jié)合物（MGB）。
該專(zhuān)利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專(zhuān)利權(quán)人授權(quán)。該專(zhuān)利全部權(quán)利屬于馬來(lái)亞大學(xué);，未經(jīng)馬來(lái)亞大學(xué);許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買(mǎi)此專(zhuān)利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201380011125.8/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來(lái)源鉆瓜專(zhuān)利網(wǎng)。
- 對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死病的衣殼蛋白基因及病毒樣顆粒
- 一種雞亞單位四聯(lián)疫苗及其制備和應(yīng)用
- 一種雞亞單位三聯(lián)疫苗及其制備和應(yīng)用
- 雞傳染性支氣管炎弱毒株S1基因及其弱毒株和應(yīng)用
- 一種傳染性喉氣管炎粘膜疫苗及其制備方法和應(yīng)用
- 一種傳染性法氏囊病毒、滅活疫苗及其制備方法
- 一種胚源性雞傳染性支氣管炎病毒的純化方法
- 雞傳染性支氣管炎強(qiáng)毒株S1基因及其強(qiáng)毒株和應(yīng)用
- 雞傳染性法氏囊病病毒VP2基因、其表達(dá)產(chǎn)物、其亞單位疫苗及應(yīng)用
- 厄他培南鈉在制備防治牛傳染性鼻氣管炎藥物中的應(yīng)用
