[發(fā)明專利]新穎的抗原的檢測方法及利用該檢測方法的裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380010090.6
• 申請日: 2013-02-20
• 公開（公告）號: CN104126121B
• 公開（公告）日: 2017-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭燦一;李昌燮;黃正九;丁鐘植
• 申請（專利權(quán)）人: 納諾恩科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/532;G01N33/543;G01N33/574
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所11038
• 代理人: 羅菊華

1.一種分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，

包括：

步驟(a)，使結(jié)合有產(chǎn)生能夠檢測的信號的標(biāo)記且與上述抗原特異性地結(jié)合的檢測抗體和分析試樣相接觸，來形成結(jié)果物，

步驟(b)，使與要檢測的抗原特異性地結(jié)合的捕獲抗體和上述步驟(a)的結(jié)果物相接觸，來形成結(jié)果物，

步驟(c)，使標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和檢測抗體相接觸，來形成結(jié)果物，上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包含特異性地結(jié)合有上述檢測抗體的表位，并與固相底物的表面相結(jié)合，上述檢測抗體結(jié)合有產(chǎn)生上述能夠檢測的信號的標(biāo)記，

步驟(d)，測定從上述步驟(b)的結(jié)果物及步驟(c)的結(jié)果物的標(biāo)記所產(chǎn)生的信號，以及

步驟(e)，分析所測定的上述信號，來決定上述分析試樣的內(nèi)部抗原的存在與否或量；

上述步驟(a)～步驟(d)或上述步驟(b)～步驟(d)在設(shè)有微通道的微芯片實(shí)施，上述信號分析是測定由上述微通道提供的反應(yīng)開始區(qū)域、試驗(yàn)區(qū)域、標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域及反應(yīng)結(jié)束區(qū)域中的信號而實(shí)施的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述捕獲抗體與固相底物的表面相結(jié)合。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述捕獲抗體及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)存在于實(shí)現(xiàn)反應(yīng)物的連續(xù)流動的一個微芯片的底物表面上。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述微芯片的微通道包括試驗(yàn)區(qū)域及標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域，上述試驗(yàn)區(qū)域的表面結(jié)合有上述捕獲抗體，上述標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域結(jié)合有上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述分析試樣適用于上述微芯片，所適用的上述分析試樣通過形成于上述微通道的流動與上述試驗(yàn)區(qū)域及標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域相接觸。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述分析試樣依次與上述試驗(yàn)區(qū)域及標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域相接觸，或者依次與上述標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域及試驗(yàn)區(qū)域相接觸。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為與上述抗原相同的物質(zhì)或者包含上述表位的上述抗原的片段。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，所測定的上述信號的分析用來計(jì)算從上述步驟(b)的結(jié)果物及步驟(c)的結(jié)果物的標(biāo)記所產(chǎn)生的信號的強(qiáng)度的比率。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，

所測定的上述信號的分析還包括計(jì)算在上述試驗(yàn)區(qū)域及標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域所測定的信號的出錯率的分析步驟；

上述出錯率是測定從上述試驗(yàn)區(qū)域及標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域位于規(guī)定距離的反應(yīng)開始區(qū)域及反應(yīng)結(jié)束區(qū)域的信號而出現(xiàn)的；

從上述反應(yīng)開始區(qū)域及反應(yīng)結(jié)束區(qū)域計(jì)算出的出錯率為20％以上的情況下，重新實(shí)施上述信號分析；

上述出錯率由[|(反應(yīng)開始區(qū)域的信號-反應(yīng)結(jié)束區(qū)域的信號)|/反應(yīng)開始區(qū)域的信號]×100來計(jì)算。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述分析試樣為全血、血漿、血清、體液或細(xì)胞培養(yǎng)上清液。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述抗原為藥物、毒素、自身抗體、自身抗原、蛋白質(zhì)、碳水化合物、核酸或癌相關(guān)抗原。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，上述抗原為癌相關(guān)抗原。

13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，從上述步驟(b)的結(jié)果物及步驟(c)的結(jié)果物的標(biāo)記所產(chǎn)生的信號的強(qiáng)度的比率值相對于上述步驟(a)的分析試樣的濃度成線性比例。

14.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，從上述步驟(b)的結(jié)果物及步驟(c)的結(jié)果物的標(biāo)記所產(chǎn)生的信號的強(qiáng)度的比率值不受實(shí)施上述分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法的溫度變化的影響。

15.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法，其特征在于，從上述步驟(b)的結(jié)果物及步驟(c)的結(jié)果物的標(biāo)記所產(chǎn)生的信號的強(qiáng)度的比率值在實(shí)施上述分析試樣的內(nèi)部抗原的檢測方法的10～30℃溫度范圍下表示相同的值。