[發明專利]一種測定樣品中抗原含量的方法

有效

• 申請號: 201380003753.1
• 申請日: 2013-01-03
• 公開（公告）號: CN103959064A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 張建棣
• 申請（專利權）人: 煙臺載通生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

1.一種測定樣品中抗原含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A.將抗原轉移到固相上；

B.用針對抗原的特異檢測抗體處理固相，以形成抗原-抗體免疫復合物；

C.用競爭分子通過與抗原競爭檢測抗體來打破免疫復合物，從免疫復合物中解放出檢測抗體；

D.收集解放出的檢測抗體；

E.測量解放出的檢測抗體來測定樣品中的抗原含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，至少部分的樣品隨抗原轉移到固相上。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在形成免疫復合物之前，所述固相先進行阻塞處理，以防止檢測抗體不通過抗原的介導而結合到固相上。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在形成免疫復合物之后，檢測抗體被解放之前，將未與抗原結合的檢測抗體從固相上除去。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗原由多肽、化合物、RNA分子、DNA分子、細胞或病毒顆粒中的一種組成。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述競爭分子由一種多肽組成。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多肽由抗原組成。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多肽由一個針對特定的檢測抗體的抗原決定簇組成。

9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多肽由抗原內同檢測抗體相互作用的區域組成。

10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多肽由多拷貝的抗原內同檢測抗體相互作用的區域組成。

11.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多肽由一種同檢測抗體結合的比抗原更緊密的多肽組成。

12.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述檢測抗體需要被標記。

13.根據權利要求12所述的方法，其特征在于，所述檢測抗體被標記的標記方法為同位素標記、紅外標記、熒光標記或標記酶標記中的一種。

14.根據權利要求12所述的方法，其特征在于，所述檢測抗體通過第二抗體被標記。

15.根據權利要求12所述的方法，其特征在于，所述競爭分子與檢測抗體的標記分子有所不同。

16.根據權利要求15所述的方法，其特征在于，所述競爭分子與檢測抗體用相匹配的不同標記分子來提高本方法的特異性。

17.根據權利要求16所述的方法，其特征在于，所述檢測抗體通過第二抗體被標記。

18.根據權利要求16所述的方法，其特征在于，所述相匹配的標記方法選自于熒光共振能量轉移的和放大發光鄰近均質檢測的方法的一種。

19.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相是一種多孔性材料。

20.根據權利要求19所述的方法，其特征在于，所述多孔材料的孔徑足以允許檢測抗體的滲透。

21.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相選自膜或一個多單元板。

22.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相選自薄膜、片或板。

23.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相由紙張、玻璃、塑料或織物組成。

24.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相為免疫酶聯吸附板。

25.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述測量檢測抗體的方法為自動化測定。