[發(fā)明專(zhuān)利]動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310756777.6
• 申請(qǐng)日: 2013-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104749270A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-07-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘國(guó)卿;鄭書(shū)展;牟峻;李剛;張春艷;白國(guó)濤
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 無(wú)
• 代理人: 無(wú)

1.動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其基本特征在于本方法包括以下步驟：

(1)樣品提取：稱(chēng)取2.5-5.0g樣品，加入20mL甲醇，渦旋后振蕩15min，超聲10min，10000r/min離心5min，上清液移出至旋蒸瓶，40℃以下旋蒸至近干。將旋蒸瓶?jī)?nèi)液體轉(zhuǎn)移至離心試管，用2ml甲醇洗滌旋蒸瓶，洗滌液轉(zhuǎn)入試管，用水定容至14ml，渦旋混勻2min，10000r/min離心5min，收集上清液待用。

(2)提取液凈化：將固相萃取柱裝好，用甲醇5ml，水5ml活化，將提取液上柱，控制流速＜2ml/min，分別用淋洗液4ml，正己烷5ml淋洗，使用6ml甲醇洗脫。洗脫液40℃以下氮?dú)獯蹈桑尤?ml定容液定容，超聲1min，過(guò)0.2μm濾膜過(guò)濾。

(3)使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(1)中洗滌旋蒸瓶的溶劑為甲醇。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(1)中用水定容的體積為14ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(2)中所用固相萃取柱為ENVI-18固相萃取住或HLB固相萃取柱。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(2)中淋洗液為丙酮+水(2+8，v/v)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(2)中定容液為乙腈+水(3+7，v/v)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于步驟(3)中液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定條件為：

高效液相色譜條件：

色譜柱：Acquity?UPLC?BEH?C18，1.7μm，2.1×100mm；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：5μl；

流動(dòng)相A：含甲醇的乙腈，流動(dòng)相B：含甲醇的水，梯度洗脫；

流速：0.3ml/min。

質(zhì)譜條件：

離子化模式：ESI+；

源電壓：2.5kV；

錐孔電壓：30V；

源溫度：120℃；

脫溶劑氣溫度：350℃；

脫溶劑氣流量：650L/H；

錐孔氣流量：50L/H。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于所述流動(dòng)相A為乙腈+甲醇(90+5，v/v)，流動(dòng)相B為水+甲醇(90+5，v/v)。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于所述梯度洗脫的梯度變化為：

0～7分鐘，流動(dòng)相A30％，流動(dòng)相B70％；

7～10分鐘，流動(dòng)相A30～50％，流動(dòng)相B70～50％；

10～12分鐘，流動(dòng)相A50～70％，流動(dòng)相B50～30％；

12～13分鐘，流動(dòng)相A70～30％，流動(dòng)相B30～70％；

13～15分鐘，流動(dòng)相A30％，流動(dòng)相B70％。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9所述的動(dòng)物源食品中兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于所述兩對(duì)糖皮質(zhì)激素同分異構(gòu)體包括倍他米松和地塞米松、氟米龍和去羥米松的至少一種。