[發明專利]一種阿基瑞林的制備方法

有效

• 申請號: 201310755456.4
• 申請日: 2013-12-31
• 公開（公告）號: CN103694316A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 顧含華;俞保彬;周天瓊
• 申請（專利權）人: 杭州華津藥業股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

技術領域

本發明屬于藥物化學技術領域，特別涉及一種阿基瑞林的制備方法。

背景技術

阿基瑞林（Argireline），又名乙酰六勝肽-3、類肉毒素桿菌素，由SNAP-25蛋白（25kDa的突觸小體相關蛋白）的N末端區衍生而來，由六個氨基酸殘基組成，分子式為C₃₄H₆₀N₁₄O₁₂S，分子量888.4，其具有式I所示結構，

阿基瑞林參與競爭SNAP-25在融泡復合體的位點，從而影響融泡復合體的形成，導致囊泡不能有效釋放神經遞質，使肌肉收縮減弱，進而可以放松肌肉、舒緩細紋使肌膚呈現清透無暇，也可以促使細胞再生使肌膚恢復柔軟彈性，因此被廣泛應用于制備化妝品和保健品。近幾年隨著人們保健意識的增強，化妝品和保健品市場越來越廣闊，阿基瑞林的市場需求也越來越大。

目前阿基瑞林的制備方法主要為片段合成法，例如，公開號為CN102603869A的專利文件所記載的制備方法。該專利文件中公開的制備方法為首先采用不同的制備方法合成了兩個三肽片段：固相合成方法制備了NH₂-Gln(Trt)-Arg(pbf)-Arg(pdf)-NH-resin肽樹脂，液相合成方法制備了Fmoc-Glu(tbu)-Gln(tbu)-Met-COOH,再將兩者進行偶聯、脫保護、酰基化、裂解，即得。該制備方法步驟繁瑣，收率較低，且因阿基瑞林肽鏈較短，用片段合成法勢必造成片段的大量浪費，這些都導致阿基瑞林的成本較高，不利于其推廣和使用。

發明內容

有鑒于此，本發明的發明目的在于提供了一種阿基瑞林的制備方法。本發明提供的制備方法采用固相合成法制備阿基瑞林，操作簡單，顯著提高了阿基瑞林的收率和純度，從而降低了其生產成本，更有利于阿基瑞林的推廣和使用。

為了實現本發明的發明目的，本發明采用如下的技術方案：

本發明提供了一種阿基瑞林的制備方法，包括以下步驟：

步驟1：取樹脂，活化，得氨基樹脂；

步驟2：取步驟1所得氨基樹脂，第一逐步偶聯胍基保護的L-精氨酸、胍基保護的L-精氨酸、側鏈氨基保護的L-谷氨酰胺，得三肽樹脂；

步驟3：取步驟2所得三肽樹脂，第二逐步偶聯L-甲硫氨酸、側鏈羧基保護的L-谷氨酸、側鏈羧基保護的N-乙酰-L-谷氨酸，得六肽樹脂；

步驟4：裂解步驟3所得六肽樹脂，得第一產品；

步驟5：取步驟4所得第一產品，純化，即得。

優選地，本發明提供的制備方法中，步驟1中樹脂為Rink?Amide-MBHA?Resin。

優選地，本發明提供的制備方法，步驟1中Rink?Amide-MBHA?Resin樹脂的替代度為0.4mmol/g～0.6mmol/g。

本發明提供的制備方法采用固相合成法制備阿基瑞林，所選用的樹脂優選為Rink?Amide-MBHA?Resin樹脂，該樹脂能夠更好地克服位阻效應的影響，更容易偶聯含側鏈保護基的氨基酸，有利于提高阿基瑞林的收率。

優選地，本發明提供的制備方法中，步驟1中活化的試劑為堿試劑。

在本發明的一些實施例中，步驟1中活化的堿試劑為六氫吡啶。

在本發明的另外一些實施例中，本發明提供的制備方法中，以體積百分比計，步驟1中活化的堿試劑為20%～30%的六氫吡啶的DMF溶液。

優選地，本發明提供的制備方法中，步驟1中活化的溫度為15℃～30℃。

優選地，本發明提供的制備方法中，步驟1中活化的時間為20分鐘～25分鐘。

優選地，本發明提供的制備方法中，步驟2中第一逐步偶聯具體為：

取步驟1所得氨基樹脂與N端保護、胍基保護的L-精氨酸在第一偶聯劑作用下，發生第一偶聯反應，經第一脫保護，得第一氨基酸樹脂；

取所得第一氨基酸樹脂與N端保護、胍基保護的L-精氨酸在第二偶聯劑作用下，發生第二偶聯反應，經第二脫保護，得二肽樹脂；

取所得二肽樹脂與N端保護、側鏈氨基保護的L-谷氨酰胺在第三偶聯劑作用下，發生第三偶聯反應，經第三脫保護，得三肽樹脂。

優選地，本發明提供的制備方法，步驟3中第二逐步偶聯具體為：

取步驟2所得三肽樹脂與N端保護的L-甲硫氨酸在第四偶聯劑作用下，發生第四偶聯反應，經第四脫保護，得四肽樹脂；