[發(fā)明專利]用于敲低VPS11的小分子干擾RNA、重組載體及其應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310746080.0 | 申請日: | 2013-12-30 |
| 公開(公告)號: | CN103695427B | 公開(公告)日: | 2017-01-11 |
| 發(fā)明(設計)人: | 楊詩涵;俞謙;李紅昌 | 申請(專利權)人: | 深圳先進技術研究院 |
| 主分類號: | C12N15/113 | 分類號: | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/76;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專利代理有限公司44202 | 代理人: | 郝傳鑫,熊永強 |
| 地址: | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 vps11 分子 干擾 rna 重組 載體 及其 應用 | ||
1.一種小分子干擾RNA,其特征在于:所述小分子干擾RNA具有與翻譯突觸融合蛋白VPS11的信使RNA互補的核苷酸序列,長度為19~27bp。
2.如權利要求1所述的小分子干擾RNA,其特征在于,所述小分子干擾RNA的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1或SEQ?ID?NO:2所示。
3.一種shRNA,為具有莖環(huán)結構的單鏈RNA,其特征在于,所述shRNA具有如權利要求1或權利要求2所述的小分子干擾RNA的正義鏈或反義鏈的核苷酸序列。
4.一種編碼shRNA的DNA,其特征在于,所述shRNA具有如權利要求1或權利要求2所述的小分子干擾RNA的正義鏈或反義鏈的核苷酸序列。
5.如權利要求4所述的編碼shRNA的DNA,其特征在于,所述編碼shRNA的DNA的含有SEQ?ID?NO:3或SEQ?ID?NO:4所示的核苷酸序列。
6.如權利要求4所述的編碼shRNA的DNA,其特征在于,所述編碼shRNA的DNA還包括RNA聚合酶III啟動子。
7.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體為在pLKO.1質粒的多克隆位點、pEN-hH1c質粒的多克隆位點或pDSL-hpUGIP質粒的重組位點插入如權利要求4~6任一所述的編碼shRNA的DNA得到的重組載體。
8.一種重組慢病毒,其特征在于,是如權利要求7的b)所述的重組載體與包膜載體psPAX2和包裝載體pMD2.G共轉染哺乳動物細胞得到的重組慢病毒。
9.一種宿主細胞,其特征在于,包括如權利要求1所述的小分子干擾RNA、如權利要求3所述的shRNA、如權利要求4所述的編碼shRNA的DNA、如權利要求7的b)所述的重組載體和如權利要求8的所述的重組慢病毒中的至少一種。
10.如權利要求1所述的小分子干擾RNA、如權利要求3所述的shRNA、如權利要求4所述的編碼shRNA的DNA、如權利要求7的b)所述的重組載體和如權利要求8的所述的重組慢病毒中的至少一種在制備抑制突觸融合蛋白VPS11基因表達的藥物中的應用。
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