[發(fā)明專利]一種酶促交聯(lián)載藥納米膠束的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310745131.8
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103705460A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 袁直;吳玉昆;賴全勇;賴舒琦;王蔚
• 申請（專利權(quán)）人: 南開大學(xué)
• 主分類號: A61K9/107
• 分類號: A61K9/107;A61K47/32;A61K31/337;A61K31/4745;A61K31/704;C08F293/00;C08F220/58;C08F220/54;A61P35/00
• 代理公司: 天津佳盟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種酶促交聯(lián)載藥納米膠束的制備方法。?

背景技術(shù)

與傳統(tǒng)的小分子藥物相比，納米給藥系統(tǒng)可將藥物定點(diǎn)定時地輸送至病變部位，減少其全身分布及用藥劑量，提高藥物的利用率，降低毒副作用。?

目前，納米給藥系統(tǒng)主要包括聚合物納米粒子（囊泡和膠束等）、偶聯(lián)聚合物的前藥、無機(jī)、金屬納米粒子等。其中基于聚合物的自組裝行為構(gòu)建納米粒子尤其是聚合物膠束是一個重要的研究領(lǐng)域。通常，通過自組裝方式獲得的膠束結(jié)構(gòu)不夠穩(wěn)定，進(jìn)入血液中循環(huán)時會被大量稀釋，導(dǎo)致藥物的提前泄露，因此對自組裝膠束的穩(wěn)定化處理，是提高其臨床應(yīng)用性能的重要手段，其中，交聯(lián)處理是主要方法，如利用胱胺分子與聚合物膠束中的聚丙烯酸（PAA）或聚N-丙烯酰氧基琥珀酰亞胺（PNAS）反應(yīng)，可實(shí)現(xiàn)膠束的交聯(lián)和穩(wěn)定化，參見：Xu?HF,?Meng?FH,?Zhong?ZY.?Reversibly?crosslinked?temperature-responsive?nano-sized?polymersomes:?synthesis?and?triggered?drug?release.?Journal?of?Materials?Chemistry?2009?，19:4183；?Li?Y,?Lokitz?BS,?Armes?SP,?McCormick?CL.?Synthesis?of?Reversible?Shell?Cross-Linked?Micelles?for?Controlled?Release?of?Bioactive?Agents.?Macromolecules?2006;39:2726–2728。還可以使用紫外光引發(fā)聚合物膠束中的碳碳雙鍵的自由基聚合實(shí)現(xiàn)交聯(lián)，參見：Xu?HF,?Meng?FH,?Zhong?ZY.?Reversibly?crosslinked?temperature-responsive?nano-sized?polymersomes:?synthesis?and?triggered?drug?release.?Journal?of?Materials?Chemistry?2009;19:4183。但這些方法引入的物質(zhì)通常具有一定的毒性且難以除凈，從而限制了其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。?

本發(fā)明使用辣根過氧化物酶和過氧化氫體系催化實(shí)現(xiàn)自組裝膠束的交聯(lián)。辣根過氧化物酶是一種常用酶，具有活性高、穩(wěn)定性好，分子量小，來源方便，生物友好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于生化檢測中，參見：Kobayashi?S,?Uyama?H,?Kimura?S.?Enzymatic?Polymerization.?Chemical?Reviews?2001;101:3793–3818。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對傳統(tǒng)的交聯(lián)方法存在的潛在的毒性和操作不夠簡便的問題，提供一種酶促交聯(lián)載藥納米膠束的制備方法，該制備方法利用辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化苯酚基團(tuán)的反應(yīng)進(jìn)行交聯(lián)，相比于傳統(tǒng)的交聯(lián)方法，具有安全無毒、操作簡便和交聯(lián)快速等優(yōu)點(diǎn)，具有良好的生物醫(yī)藥應(yīng)用前景。?

本發(fā)明的技術(shù)方案：?

一種酶促交聯(lián)載藥納米膠束的制備方法，包括下述步驟：

1）嵌段共聚物的合成

先合成含有苯酚基團(tuán)的丙烯酰胺或丙烯酸酯類單體，制備可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移（Reversible?addition?fragmentation?chain-transfer，RAFT）聚合所需的聚乙二醇大分子鏈轉(zhuǎn)移劑，或者原子轉(zhuǎn)移自由基（ATRP）聚合所需的聚乙二醇大分子引發(fā)劑，然后進(jìn)行以上的功單體和溫敏單體例如N-異丙基丙烯酰胺的RAFT聚合或ATRP聚合，得到含有苯酚基團(tuán)的兩親型嵌段共聚物；

2）酶促交聯(lián)載藥納米膠束的制備

在低于嵌段共聚物的最低臨界溶解溫度（LCST）下，分別配置藥物、辣根過氧化物酶和嵌段共聚物的溶液，混合均勻，然后再升溫到嵌段共聚物的最低臨界溶解溫度（LCST）以上，將藥物包封在自組裝得到的聚合物膠束內(nèi)核中；加入過氧化氫，使用辣根過氧化物酶（HRP）催化過氧化氫氧化膠束內(nèi)核中的苯酚官能團(tuán)進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)，即可得到酶促交聯(lián)載藥納米膠束。