[發明專利]一種人體表皮組織的快速構建制備方法

有效

• 申請號: 201310737713.1
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103721294A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 安美文;劉陽;王立;陳凌峰
• 申請（專利權）人: 太原理工大學
• 主分類號: A61L27/60
• 分類號: A61L27/60;A61L27/26
• 代理公司: 太原市科瑞達專利代理有限公司 14101
• 代理人: 江淑蘭

技術領域???

本發明涉及一種人體表皮組織的快速構建制備方法，屬生物組織材料構建及制備應用的技術領域。

背景技術????

皮膚覆蓋于人體表面，是人體最大的器官，皮膚作為人體的第一道生理防線，時刻參與著機體的功能活動，通過分泌、排泄和吸收等功能維持體內代謝平衡，保護機體內組織器官免受外界環境傷害；人體皮膚組織由表皮、真皮和皮下組織構成，人體表皮在皮膚創傷后的修復中具有重要作用，如創面不能及時愈合常會造成水份、蛋白質的丟失，增加感染幾率，且極易形成增生性瘢痕，如能及早移植表皮封閉創面，可有效減少或減輕增生性瘢痕的形成。

瘢痕病人是一個巨大的群體，尤其是皮膚燒傷居多，小面積皮膚燒傷病人多采用自體皮膚移植，對于大面積皮膚深度燒傷病人，自體供皮有限，體外構建類似人體的表皮結構治療皮膚燒傷病人是有效的；體外表皮重建的方法也有多種形式，例如Genzyme公司的表皮膜，以及表皮替代物；但是由于人體表皮組織體外培養條件嚴格，時間較長，往往達不到臨床治療快速封閉創面的要求和時間，故尋求一種快速構建制備人體表皮組織的方法是十分必要的。

發明內容???

發明目的???

本發明的目的是針對背景技術的情況，采用殼聚糖和明膠形成薄膜，培養人體表皮角質形成細胞，在高壓無菌下生成人體表皮角質形成細胞薄膜，以快速構建制成人體表皮組織，增強皮膚移植治療的效果。

技術方案

本發明使用的化學物質材料為：人體皮膚組織、殼聚糖、明膠、人體表皮角質形成細胞培養液、高糖培養基、氯化鈣、碘酒、磷酸鹽溶液、硫酸慶大霉素、青霉素、蛋白酶、膠原酶、胎牛血清、胰蛋白酶、乙二胺四乙酸、醋酸、戊二醛、氫氧化鈉、硼氫化鈉、二氧化碳、滅菌去離子水、二甲基亞砜、生理鹽水，其準備用量如下：以克、毫升、毫米、厘米³為計量單位；

人體皮膚組織：????????????????????????????????????50g±0.1g

殼聚糖：??????????????????????????????????????????5g±0.01g

明膠：????????????????????????????????????????????5g±0.01g

人體表皮角質形成細胞培養液：Ca²⁺濃度0.09?mmol/L????200mL±1mL

高糖培養基：Ca²⁺濃度1.8mmol/L?????????????????????200mL±1mL

氯化鈣：??????????????????????????????????????????0.5?g±0.001g

碘酒：????????????????????????????????????????????10mL±0.1mL

磷酸鹽溶液：??????????????????????????????????????500mL±5mL

硫酸慶大霉素：40000單位/mL???????????????????????4mL±0.1mL

青霉素：800000單位/g??????????????????????????????5g±0.1g

蛋白酶：??????????????????????????????????????????0.5g±0.?001g

膠原酶：??????????????????????????????????????????0.5g±0.?001g

胎牛血清：????????????????????????????????????????20mL±1mL

胰蛋白酶：????????????????????????????????????????0.5g±0.?001g

乙二胺四乙酸：????????????????????????????????????0.05g±0.?001g

醋酸：????????????????????????????????????????????5mL±0.1mL

戊二醛：濃度50%??????????????????????????????????5mL±0.1mL

氫氧化鈉：????????????????????????????????????????5g±0.1g