[發明專利]一種反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法

有效

• 申請號: 201310733115.7
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103760291A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 曾亞麗;楊明泉;賈愛娟;陳穗;劉占;孫麗霞;李嘉玲
• 申請（專利權）人: 廣東美味鮮調味食品有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司 44104
• 代理人: 劉小敏;馬赟齋

1.一種反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，包括以下步驟：

(1)?稱取花生油樣品，用石油醚Ⅰ將樣品溶解稀釋，然后轉入預填充氧化鋁層析柱中，用石油醚Ⅰ進行淋洗與洗脫，收集洗脫液，洗脫液經吹氮濃縮至干后，殘渣采用乙腈水混合溶液渦旋溶解，獲得樣品處理液；

(2)?取樣品處理液進行反相高效液相色譜分析，獲得色譜分析數據；

(3)?取苯并(a)芘標準品用乙腈水混合溶液作溶劑配制標準工作液，上機測定，繪制標準曲線，求得苯并(a)芘校正因子；

(4)?將步驟(2)的獲得的色譜分析數據與苯并(a)芘的校正因子比對，得到花生油中苯并(a)芘的含量。

2.根據權利要求1所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述的步驟(1)中的預填充氧化鋁層析柱采用以下方法制成：將22g中性氧化鋁裝入內徑為14~16mm的玻璃層析柱中，輕敲柱壁，使氧化鋁填充密實，加入無水硫酸鈉，無水硫酸鈉的填充高度為27~33mm，關閉柱旋塞，在柱頂端覆蓋一層石蠟封口膜，充入干燥潔凈的氮氣后，用封口膜封嚴柱頂端，制成預填充氧化鋁層析柱，避光備用。

3.根據權利要求1所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述步驟(1)中樣品處理液的制備具體為：在在氧化鋁層析柱中加入石油醚Ⅰ進行活化，然后稱量花生油樣品，用石油醚Ⅰ溶解稀釋后移入氧化鋁層析柱中，用石油醚Ⅰ淋洗與洗脫，收集洗脫液，洗脫液置于燒瓶內并在40~50℃水浴上吹氮濃縮至0.1~0.5ml，將濃縮液轉移入樣品瓶中，用石油醚Ⅰ洗滌燒瓶內壁，洗滌液移入樣品瓶中，吹氮至干，再重復一次洗滌吹氮操作，殘渣用乙腈水混合溶液溶解，即得樣品處理液。

4.根據權利要求3所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述乙腈水混合溶液中乙腈和水的體積比為9:1~19:1。

5.根據權利要求1所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述步驟(2)的色譜條件為：毛細管色譜柱采用多環芳烴分析柱；柱溫為25~35℃；流速為1.0~1.2ml/min；自動進樣10~20μl，流動相為乙腈和水體積比為9~19:1的乙腈水混合溶液，增益值12~16，激發波長380nm，發射波長410nm。

6.根據權利要求5所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述多環芳烴分析柱為Ultimate?PAH、Supelcosil?LC-PAH或Eclipse?PAH。

7.根據權利要求1至6任一項權利要求所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述步驟(1)中的稱樣量為4~5g。

8.根據權利要求7所述的反相高效液相色譜外標法測定花生油中苯并(a)芘含量的方法，其特征是，所述步驟(4)中苯并(a)芘的校正因子是通過用含0~12μg/L的苯并(a)芘系列標準溶液，在相同的反相高效液相色譜條件下測得。