[發明專利]一種紫玉蘭組織培養方法

有效

• 申請號: 201310730707.3
• 申請日: 2013-12-25
• 公開（公告）號: CN103718966A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 陳鳳花
• 申請（專利權）人: 陳鳳花
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 劉冬梅;羅娟

技術領域

本發明涉及植物組織培養領域，主要涉及的的是紫玉蘭的組織培養方法。

背景技術

紫玉蘭，又名木蘭、辛夷，為中國特有植物，分布在中國云南，福建，湖北，四川等地，生長于海拔300至1600米的地區，一般生長于山坡邊緣。紫玉蘭花朵艷麗怡人，芳香淡雅，孤植或叢植都很美觀，是優良的庭園、街道綠化植物，又是中國傳統的花卉和中藥，但是紫玉蘭不易移植和養護，已經被錄入《世界自然保護聯盟》植物紅色名錄，是非常珍貴的花木。

現在隨著技術的發展，很多地區都在開展紫玉蘭培養的方法，想在本地區培育種植紫玉蘭。傳統的紫玉蘭一般采用播種、扦插、嫁接、壓條和分株繁殖等培養方式。這些培養方式的耗時長，而且繁育不易成活。現有的一些紫玉蘭組織培養方式是在封閉的無菌條件下進行的，所需成本較大，而且還存在著組織培養中外植體容易褐化，成活率不高的問題，不能用于紫玉蘭的大量繁殖。

發明內容

本發明針對現有的技術問題，提出一種紫玉蘭組織培養方法，該方法在開放式條件下進行，不用置備一個封閉式無菌環境，節約了成本；對紫玉蘭滅菌處理，保證了外植體無菌污染，提高其培養成活率高；用2％PVP浸泡外植體以及在培養基中加入2％PVP，減輕了外植體的褐化，提高了外植體的成活率。該紫玉蘭組織培養方法是在操作簡單，時間短，成本低廉，成活率高、生根率高，并能實現短期內的出瓶移栽。本發明的組織培養方法能夠保持原品種的優良性狀，為良種繁育和產業化生產奠定基礎。

本發明的紫玉蘭組織培養方法通過如下的操作來實現上述目的：

1、使用抑菌劑為殺菌保果、代森錳鋅和次氯酸中一種或幾種對進行紫玉蘭組織培養的場地做滅菌抑菌處理；

2、外植體的選擇：選擇直徑為1～2cm帶有腋芽的紫玉蘭枝條為外植體，剪去枝條的葉片，并將其剪成1～2cm的帶腋芽的莖段；

3、外植體的消毒滅菌：先用自來水把外植體沖洗6～10min，然后把外植體浸沒在濃度為0.1％的升汞溶液里，并加入2～3ml吐溫溶液，把外植體浸泡在該混合溶液中7～13min，最后用無菌水把外植體沖洗4～6次；

4、初始誘導培養：將消毒滅菌后的外植體用2％PVP浸泡2～5min，然后將該莖段按末端向上插入WPM基本培養基中，在22～26℃，光強2000～3000Lxt條件下進行初始培養；3～5天后觀察，將未污染的植物莖段轉入新的培養基中，繼續培養10～15天至新芽長出；

5、伸長培養：將長出新芽的外植體莖段轉插入伸長培養基中，即是基本培養基WPM中加入6-BA0.2～0.6mg/L、NAA0.3～0.6mg/L、GA30.2～0.4mg/L以及NAA0.8～1.0g/L，在伸長培養基中進行新芽的伸長培養，在22～26℃，光強2000～3000Lxt條件下培養15～20天，至新芽伸長到0.2～0.6cm；

6、增殖培養：將長出的新芽接入含有生長調節物質BA0.8～1.2mg/L和NAA0.08～0.12mg/L的WPM培養基中，在22～26℃，光強2000～3000Lxt條件下培養23～26天；

7、生根培養：將增殖培養得到的組培苗在4～7℃冷藏10～14天，轉接到生根培養基中，該生根培養基為：WPM基本培養基中加入0.8～1.0mg/LNAA，在生根培養集中繼續培養15～20天；之后再將該組培苗轉接到含有2％PVP的WPM培養基中繼續培養10～15天，生根后進行煉苗；將生根苗移接到室外進行培養。

本發明的有益之處：與現有技術相比，本發明針對現有的技術問題，提出一種紫玉蘭組織培養方法，該方法在開放式條件下進行，不用置備一個封閉式無菌環境，節約了成本；對紫玉蘭的滅菌保證了外植體無菌污染，提高其培養成活率；用2％PVP浸泡外植體以及在培養基中加入2％PVP，減輕了外植體的褐化，提高了外植體的成活率。該紫玉蘭組織培養方法是在操作簡單，時間短，成本低廉，成活率高、生根率高，并能實現短期內的出瓶移栽。本發明的組織培養方法能夠保持原品種的優良性狀，為良種繁育和產業化生產奠定基礎。

具體實施方式

以下對本發明做進一步的說明。

實施例1

使用抑菌劑為殺菌保果、代森錳鋅和次氯酸中一種或幾種對進行紫玉蘭組織培養的場地做滅菌抑菌處理；

外植體的選擇：選擇直徑為1.5cm帶有腋芽的生長健壯，無病蟲毒害的紫玉蘭枝條為外植體，剪去枝條的葉片，并將其剪成1.5cm的帶腋芽的莖段；