[發明專利]一種G6PD缺乏癥基因檢測膜條以及PCR引物

有效

• 申請號: 201310730702.0
• 申請日: 2013-12-26
• 公開（公告）號: CN103695554A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 陸小梅;黎四平;李文瑞;彭琪
• 申請（專利權）人: 東莞市石龍博愛醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 東莞市華南專利商標事務所有限公司 44215
• 代理人: 卞華欣

1.一種G6PD缺乏癥的基因檢測膜條，包括基底膜條以及在所述基底膜條上固定有特異性的突變探針和正常對照探針，其特征在于：共包括20條突變探針型和13條正常對照探針，所述20種突變探針分別為：A95G、G392T、G487A、A493G、T517C、C519T、C519G、C592T、A835G、A835T、G871A、C1004T、C1004A、C1024T、C1311T、C1360T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。

2.根據權利要求1所述的一種G6PD缺乏癥的基因檢測膜條，其特征在于：所述突變探針和正常對照探針的3’端或5’端帶有氨基標記，所述突變探針的具體序列為：

A95G?????GGATACACGCATATTCATCA

G392T????CTCCACCTGGTGTCACAG

G871A?????AGGTCAAGATGTTGAAATG

C1004T???CACCACCGTCACTTTTGCA

C1004A?CACCACCGACACTTTTGCA

C1024T????AGCCGTCGTCTTCTATGT

C1360T???GCACTTCGTGTGCAGGTGA

G1376T?GAGCTCCTTGAGGCCTGG

G1381A?GAGCTCCGTGAGACCTGG

C1387?A????CCTGGAGTATTTTCACCCC

G1388A?CCTGGCATATTTTCACCCC

G487A?????GCTCCCAGCAGAAGCT

A493G?????CTGGGACCGCATCAT

T517C?????CTCCCGAGGGGCTTC

C519T?????CTCCCAAAGGGCTTCTC

C519G??????CTCCCCAAGGGCTTCTC

C592T?????ATCTACTGCATCGACCA

A835G?????CGCCTCCGCCAACTCA

A835T?????CGCCTCCTCCAACTCA

C1311T???TGACGCCTATGAGCGC；

所述正常對照探針的具體序列為：

95N?GGATACACACATATTCATCA

392N???CTCCACCTGGGGTCACAG

871N???AGGTCAAGGTGTTGAAATG

1004N??CACCACCGCCACTTTTGCA

1024N??AGCCGTCGTCCTCTATGT

1360N??GCACTTCGTGCGCAGGTGA

1376/1381N???GAGCTCCGTGAGGCCTGG

1387/1388N????CCTGGCGTATTTTCACCCC

487/493N?????CAGAGGCTGGAACCG

517/519N?????CTCCCGAAGGGCTTCTC

592N???????ATCTACCGCATCGAC

835N?????CGCCTCCACCAACTCA

1311N??????TGACGCCTACGAGCG。

3.根據權利要求1所述的一種G6PD缺乏癥的基因檢測膜條，其特征在于：所述基因檢測膜條由以下方法制備而成：

a.??用打印機在基底膜條上打印位點陣列；

b.??用EDAC溶液浸泡打印后的膜條：將浸泡后的膜條置于水平搖床上輕搖浸泡30min，以活化膜條表面的羧基基團；

c.??分別用探針稀釋液將33條探針稀釋至5μmol/L；

d.??將探針點加在膜條相應位點上，探針上的氨基與膜條表面的羧基發生交聯反應；

e.??待膜條干燥后，用0.1mol/L的NaOH溶液浸泡膜條5分鐘，以封閉膜條表面未反應的羧基；

f.??純水洗滌膜條，干燥后即可。