[發(fā)明專利]喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310727270.8
• 申請日: 2013-12-25
• 公開（公告）號: CN103675163A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何桂華;韓煥美;鄭新華;張愛霞;陳晞;包海英;李曉明
• 申請（專利權(quán)）人: 濟(jì)南出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 濟(jì)南誠智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 王汝銀

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法。

背景技術(shù)

喹啉黃（Quinoline?Yellow）：CAS號：8004-92-0，分子式：C₁₈H₉NO₈Na₂S₂，分子量：477.38，是水溶性偶氮類合成的食用黃色色素（著色劑），在英國常用于雪糕、水果、蛋糕、巧克力、面包、奶酪醬、軟飲料等食品的著色。由于該色素可能導(dǎo)致兒童多動癥，日本、美國及挪威禁用于食品，而中國僅允許在預(yù)調(diào)酒中添加。喹啉黃的結(jié)構(gòu)式如下：

喹啉黃主要以芳烴類化工產(chǎn)品為原料，經(jīng)過磺化、偶氮化等一系列有機(jī)反應(yīng)化合而成，以不僅無營養(yǎng)價(jià)值，而且其化學(xué)構(gòu)成物質(zhì)本身對人體有害。同時(shí)在合成過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)如砷、汞、苯酚、苯胺、鉛、鎘、乙醚、氯化物、硫酸鹽等均有不同程度的毒性。合成著色劑喹啉黃進(jìn)入人體后會大量消耗體內(nèi)解毒物質(zhì)，干擾人體正常代謝功能并直接作用靶器官，其毒性主要表現(xiàn)為不耐受性、致癌性、兒童多動癥。基于此，對食品安全的要求日益提高，對喹啉黃的添加量檢測越來越受到重視，用于其檢測的標(biāo)準(zhǔn)樣品的的制備也處于重要地位，因此，亟需制備出一種喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品，其成分在一定時(shí)期內(nèi)相對穩(wěn)定，用于對含喹啉黃產(chǎn)品的檢測。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法。該方法制備的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品均勻性好、量值準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好，可以用于對分析儀器的校準(zhǔn)，檢測方法的評定和對喹啉黃含量的測定。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：

喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，包括以下步驟：

S1：喹啉黃的高速逆流色譜分離純化

高速逆流色譜的分離溶劑體系：正丁醇-10%硫酸溶液-水兩相溶劑體系；

①準(zhǔn)備喹啉黃粗樣；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的兩相溶劑體系，充分振搖后靜置10-14h，分層，其中，上相作為固定相，下相作為流動相；

③將喹啉黃粗樣溶解于兩相溶劑體系中，配制成樣品溶液；

④將固定相泵入分離柱，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)速度控制器，使高速逆流色譜儀螺旋管柱按照順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到700-900r/min時(shí)，泵入流動相，并通過六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣，待流動相開始流出色譜柱時(shí)，收集高速逆流色譜分離后的各峰流出液，然后將收集的溶液通過高效液相色譜檢測，確定目標(biāo)成分，檢測波長為254nm；從高速逆流色譜上，可以得到最多組分和次多組分分離的信息，然后在高效液相色譜上分析判斷，確定目標(biāo)成分。

S2：喹啉黃樣品脫酸

取步驟S1中確定的目標(biāo)成分，用水溶解后，置于分液漏斗中，然后用等體積的飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇層減壓蒸干，然后用10mL水溶解后通過凝膠柱色譜（sephadexLH-20）分離，收集黃色部分，減壓濃縮得到目標(biāo)成分，室溫干燥得純品喹啉黃；即為喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品。

S3：分裝與儲存

將制得喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品，用棕色瓶進(jìn)行分裝，室溫干燥避光密封保存。

優(yōu)選的，所述正丁醇、10%硫酸溶液、水的體積比為5：1：4。

優(yōu)選的，所述步驟④中轉(zhuǎn)速為800r/min。

優(yōu)選的，所述步驟④中固定相泵入分離柱的速度為20mL/min；流動相的泵入速度為2.0mL/min。

優(yōu)選的，所述步驟③為將喹啉黃粗樣溶解于兩相溶劑體系中，配制成濃度為25mg/mL的樣品溶液。

本發(fā)明的優(yōu)選的技術(shù)方案為：

S1：喹啉黃的高速逆流色譜分離純化

高速逆流色譜的分離溶劑體系：正丁醇-10%硫酸溶液-水兩相溶劑體系；

①準(zhǔn)備喹啉黃粗樣；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的兩相溶劑體系，充分振搖后靜置10-14h，分層，其中，上相作為固定相，下相作為流動相，正丁醇、10%硫酸溶液、水的體積比為5：1：4；

③將將粗樣200mg溶解于4mL上相和4mL下相的混合溶劑中，配制成樣品溶液；

④將固定相以20mL/min的速度泵入分離柱，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)速度控制器，使高速逆流色譜儀螺旋管柱按照順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到800r/min時(shí)，以2.0mL/min的速度泵入流動相，并通過六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣，待流動相開始流出色譜柱時(shí)，收集高速逆流色譜分離后的各峰流出液，然后將收集的溶液通過高效液相色譜檢測，確定目標(biāo)成分；