[發(fā)明專利]喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310727270.8
• 申請(qǐng)日: 2013-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN103675163A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何桂華;韓煥美;鄭新華;張愛霞;陳晞;包海英;李曉明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06
• 代理公司: 濟(jì)南誠智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 王汝銀

1.喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，包括以下步驟：

S1：喹啉黃的高速逆流色譜分離純化

高速逆流色譜的分離溶劑體系：正丁醇-10%硫酸溶液-水兩相溶劑體系；

①準(zhǔn)備喹啉黃粗樣；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的兩相溶劑體系，充分振搖后靜置10-14h，分層，其中，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相；

③將喹啉黃粗樣溶解于兩相溶劑體系中，配制成樣品溶液；

④將固定相泵入分離柱，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)速度控制器，使高速逆流色譜儀螺旋管柱按照順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到700-900r/min時(shí)，泵入流動(dòng)相，并通過六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣，待流動(dòng)相開始流出色譜柱時(shí)，收集高速逆流色譜分離后的各峰流出液，然后將收集的溶液通過高效液相色譜檢測(cè)，確定目標(biāo)成分；

S2：喹啉黃樣品脫酸

取步驟S1中確定的目標(biāo)成分，用水溶解后，置于分液漏斗中，然后用等體積的飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇層減壓蒸干，然后用10mL水溶解后通過凝膠柱色譜（sephadexLH-20）分離，收集黃色部分，減壓濃縮得到目標(biāo)成分，室溫干燥得純品喹啉黃，即為喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品；

S3：分裝與儲(chǔ)存

將制得喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品用棕色瓶進(jìn)行分裝，室溫干燥避光密封保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述正丁醇、10%硫酸溶液、水的體積比為5：1：4。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述步驟④中轉(zhuǎn)速為800r/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述步驟④中固定相泵入分離柱的速度為20mL/min；流動(dòng)相的泵入速度為2.0mL/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，所述步驟③為將喹啉黃粗樣溶解于兩相溶劑體系中，配制成濃度為25mg/mL的樣品溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意權(quán)利要求所述的喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是，包括以下步驟：

S1：喹啉黃的高速逆流色譜分離純化

高速逆流色譜的分離溶劑體系：正丁醇-10%硫酸溶液-水兩相溶劑體系；

①準(zhǔn)備喹啉黃粗樣；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的兩相溶劑體系，充分振搖后靜置10-14h，分層，其中，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相，正丁醇、10%硫酸溶液、水的體積比為5：1：4；

③將將粗樣200mg溶解于4mL上相和4mL下相的混合溶劑中，配制成樣品溶液；

④將固定相以20mL/min的速度泵入分離柱，待固定相充滿管道后，打開主機(jī)速度控制器，使高速逆流色譜儀螺旋管柱按照順時(shí)針的方向旋轉(zhuǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到800r/min時(shí)，以2.0mL/min的速度泵入流動(dòng)相，并通過六通進(jìn)樣閥進(jìn)樣，待流動(dòng)相開始流出色譜柱時(shí)，收集高速逆流色譜分離后的各峰流出液，然后將收集的溶液通過高效液相色譜檢測(cè)，確定目標(biāo)成分；

S2：喹啉黃樣品脫酸

取步驟S1中確定的目標(biāo)成分，用水溶解后，置于分液漏斗中，然后用等體積的飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇層減壓蒸干，然后用10mL水溶解后通過凝膠柱色譜（sephadexLH-20）分離，收集黃色部分，減壓濃縮得到目標(biāo)成分，室溫干燥得純品喹啉黃，即為喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品；

收集高速逆流色譜分離純化后的目標(biāo)成分，用水溶解后，置于分液漏斗中，然后用等體積的飽和正丁醇反復(fù)萃取三次，合并正丁醇層減壓蒸干，然后用10mL水溶解后通過凝膠柱色譜（sephadexLH-20）分離，收集黃色部分，減壓濃縮得到目標(biāo)成分，室溫干燥得即為喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品；

S3：分裝與儲(chǔ)存

將制得喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品，用棕色瓶進(jìn)行分裝，每瓶20mg共100瓶，編號(hào)后在室溫干燥避光密封保存。