[發明專利]一種雨城丹桂愈傷組織分化及增殖方法

有效

• 申請號: 201310725163.1
• 申請日: 2013-12-25
• 公開（公告）號: CN103733998A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 王良桂;楊秀蓮;王亞莉;張春霞;凌敏
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 邱興天

1.一種雨城丹桂愈傷組織分化及增殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）從健康茁壯的雨城丹桂樹上，選取盛花期時的新鮮花梗，進行消毒處理；

2）無菌條件下，將處理后的材料接種于誘導及分化培養基上，溫度25±1℃，全黑暗條件下，培養至分化；其中，誘導及分化培養基為：B5+6-BA2.0~3.0mg/L+2,4-D0.05mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.8g/L，pH5.5；

3）將已分化的愈傷組織接種于增殖培養基中，溫度25±1℃，光照時間為12h/天，光照強度為2500lx，25天繼代增殖一次，即可；其中，增殖培養基為：B5+6-BA3.0mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.8g/L，pH?5.5。

2.根據權利要求1所述的雨城丹桂愈傷組織分化及增殖方法，其特征在于：步驟1）中，從健康茁壯的雨城丹桂樹上選取盛花期時的新鮮花梗，先用加入少量去污粉的自來水浸泡1小時，然后用流水沖洗3小時；在水平超凈工作臺的無菌條件下，將沖洗過的花梗在75%的酒精中浸泡30秒后，在2%的次氯酸鈉溶液中浸泡3分鐘，再用無菌水仔細沖洗5遍。

3.根據權利要求1所述的雨城丹桂愈傷組織分化及增殖方法，其特征在于：步驟2）中，誘導及分化培養基為：B5+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.05mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.8g/L，pH5.5。