[發明專利]里氏木霉發酵生產纖維素酶的方法及其菌株應用有效
| 申請號: | 201310716987.2 | 申請日: | 2013-12-23 |
| 公開(公告)號: | CN103740680A | 公開(公告)日: | 2014-04-23 |
| 發明(設計)人: | 李洪兵;李貴駿;胡永明;易繼云;劉文明 | 申請(專利權)人: | 湖南鴻鷹生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/42 | 分類號: | C12N9/42;C12R1/885 |
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| 地址: | 415400 湖*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 里氏 發酵 生產 纖維素酶 方法 及其 菌株 應用 | ||
1.里氏木霉發酵生產纖維素酶的方法,其特征在于,所述里氏木霉為保藏編號CCTCC?NO:M2013540的菌株,具體方法如下:CCTCC?NO:M2013540純化菌株按5%的接種量接種于發酵培養基中,逐級擴大培養制備種子液,培養時間為72-96小時;種子液按發酵液體積5-10%的接種量接種于發酵培養基中,20-35℃培養96-144小時,即里氏木霉發酵生產纖維素酶結束;將發酵液在4000-6000rpm離心,收集所得液體為粗酶液;得到的粗酶液進行超濃縮過濾,得到濃縮酶液。
2.根據權利要求1所述的里氏木霉發酵生產纖維素酶的方法,其特征在于,所述發酵培養基制備方法為:纖維素粉10%、硫酸銨0.5%、硫酸鎂0.025%、磷酸二氫鉀0.1%、氯化鈉0.01%、其余為水,pH值5-6,121℃滅菌20min。
3.根據權利要求1或2所述的里氏木霉發酵生產纖維素酶的方法,其特征在于,所述粗酶液中纖維素酶的外切β-葡聚糖酶、內切β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和濾紙酶活力分別達到680U/mL、1389U/mL、486U/mL和792U/mL。
4.據權利要求1或2所述的里氏木霉發酵生產纖維素酶的方法,所述菌株產纖維素酶的pH3.0-6.0;溫度為23~35℃。
5.要求1-4所述菌株里氏木霉(Trichoderma?reesei)CCTCC?NO:M2013540在纖維素酶發酵生產中的應用。
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