[發明專利]一種制備hEGF粗制品的方法有效
| 申請號： | 201310715778.6 | 申請日： | 2013-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN103694334A | 公開（公告）日： | 2014-04-02 |
| 發明（設計）人： | 苗丕渠;蘇古方;吳蓉蓉;侯曉彥 | 申請（專利權）人： | 揚州艾迪生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/485 | 分類號： | C07K14/485;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 謝東 |
| 地址： | 225008 江蘇省揚*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 制備 hegf 粗制品 方法 | ||
1.一種制備hEGF粗制品的方法，其特征在于：收集吸附尿蛋白后的吸附劑，集中洗脫，將洗脫出的尿蛋白溶液上樣已平衡好的金屬螯合層析柱，收集含有hEGF組分的洗脫峰，經過硫酸銨沉淀，制備hEGF粗制品。
2.根據權利要求1所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于，包括如下步驟：
將陰離子交換樹脂作為吸附劑放置在公共廁所的尿池或尿斗中，吸附流經尿液或稀釋尿液中的尿蛋白；
收集已吸附尿蛋白的樹脂，進行清洗、解吸處理；
超濾濃縮；
超濾濃縮液調節pH和電導，上樣已平衡好的金屬螯合層析柱，再用平衡液沖洗；
用洗脫溶液洗脫，收集含有hEGF組分的洗脫峰；
在收集的洗脫峰中加入硫酸銨粉末至飽和，靜置2－10小時后，收集沉淀，得
到hEGF粗制品。
3.根據權利要求1或2所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于：所述的金屬螯合層析柱螯合的金屬離子是Cu2+、Zn2+、Ni2+、Fe3+中的任意一種。
4.根據權利要求1或2所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于，金屬螯合層析柱平衡液為0.01－0.2M磷酸鹽緩沖液，NaCl濃度為0.2－2.0M，pH6.0-8.0。
5.根據權利要求1或2所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于：所述的金屬螯合層析柱洗脫溶液為0.05-0.2M磷酸鹽緩沖液，NH4Cl濃度為0.5-1.0M，pH6.0-8.0。
6.根據權利要求2所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于，步驟4中超濾濃縮液調節pH6－8，電導0.5－10mS/cm。
7.根據權利要求2所述的制備hEGF粗制品的方法，其特征在于，在步驟4和步驟5之間，增加一個沖洗步驟，使用pH3－6，NaCl濃度≤0.2M來沖洗金屬螯合層析柱，所述的沖洗液緩沖介質為0.01－0.2M磷酸鹽或醋酸鹽。
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