[發明專利]一種無抗生素四價抗病蟲和除草劑植物表達載體及應用

有效

• 申請號: 201310715572.3
• 申請日: 2013-12-23
• 公開（公告）號: CN103805620B
• 公開（公告）日: 2016-02-24
• 發明（設計）人: 陳平華;張卓;陳忠偉;王恒波;施桂姣;項慰;劉迪;邰連賽;高世武;林冰;陳利平;陳容;高三基;許莉萍;陳如凱
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/63;C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種無抗生素四價抗病蟲和除草劑植物表達載體，其特征在于：所述載體的T-DNA區結構為：右邊界-35S啟動子-正向雙價抗病序列-內含子-反向雙價抗病序列-OCS終止子-Ubi啟動子-抗蟲基因-NOS終止子-NOS啟動子-抗除草劑基因-NOS終止子-左邊界，T-DNA區左右邊界內無抗生素基因，其中正向雙價抗病序列即甘蔗花葉病毒和甘蔗黃葉病毒雙價干擾序列，其DNA序列如SEQIDNO.1所示；所述抗蟲基因為Cry1AC基因；所述抗除草劑基因為Bar基因。

2.根據權利要求1所述的無抗生素四價抗病蟲和除草劑植物表達載體，其特征在于：所述載體的構建如下：

（1）將甘蔗花葉病毒外殼蛋白基因和甘蔗黃葉病毒外殼蛋白基因的保守區融合在一起，形成正向雙價抗病序列，其DNA序列如SEQIDNO.1所示；

（2）將步驟（1）所得融合基因以反向重復的方式與內含子相連，構建甘蔗花葉病毒和甘蔗黃葉病毒雙價干擾結構，結構為35S啟動子-正向雙價抗病序列-內含子-反向雙價抗病序列-OCS終止子；

（3）構建含步驟（1）所述融合基因、Cry1AC基因和Bar基因的無抗生素四價抗病蟲和除草劑植物表達載體，T-DNA區結構為：右邊界-35S啟動子-正向雙價抗病序列-內含子-反向雙價抗病序列-OCS終止子-Ubi啟動子-抗蟲基因-NOS終止子-NOS啟動子-抗除草劑基因-NOS終止子-左邊界，T-DNA區左右邊界內無抗生素基因。

3.權利要求1所述的無抗生素四價抗病蟲和除草劑植物表達載體在甘蔗轉基因中的應用。