[發明專利]一種高活性的甲基對硫磷水解酶突變體及其應用在審
| 申請號： | 201310714107.8 | 申請日： | 2013-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN104726426A | 公開（公告）日： | 2015-06-24 |
| 發明（設計）人： | 鄭春楊;王磊;鮑蓬;張先恩;張治平;王殿冰;王琳 | 申請（專利權）人： | 北京百川飛虹生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;C11D3/386;A23L1/015;B09C1/10 |
| 代理公司： | 無 | 代理人： | 無 |
| 地址： | 100102 北京市朝陽*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 活性 甲基 對硫磷 水解 突變體 及其 應用 | ||
1.一種重組甲基對硫磷水解酶突變體，其特征在于，以說明書中所附的序列2為參考序列，其具有選自第6位、第14位、第82位和第158位的至少一個突變，并且以甲基對硫磷為底物其具有比親本高出至少80％的甲基對硫磷水解酶突變體活性。
2.權利要求1所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中第6位的R突變為H。
3.權利要求1所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中第14位的R突變為P，第82位的G突變為D。
4.權利要求1所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中第158位的S突變為Q。
5.權利要求1所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其具有說明書所附序列表中序列2至序列4之一所示的氨基酸序列。
6.根據權利要求5所述的甲基對硫磷水解酶突變體，進一步包括至少一個共價連接至所述蛋白的聚乙二醇(PEG)部分。
7.根據權利要求6所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中所述PEG部分連接至所述蛋白的半胱氨酸位點。
8.根據權利要求6或7所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中所述PEG部分是(PEG)n。
9.根據權利要求6-8中任一項所述的甲基對硫磷水解酶突變體，其中所述PEG部分是一種PEG衍生物。
10.一種DNA，其含有編碼權利要求1-4任一項所述的甲基對硫磷水解酶突變體的核苷酸序列。
11.一種包括權利要求10所述的DNA的表達載體。
12.一種包括權利要求10所述的DNA的宿主細胞。
13.一種利用權利要求11所述的表達載體轉化的宿主細胞。
14.根據權利要求12或13所述的宿主細胞，其中所述宿主細胞為原核細胞。
15.根據權利要求15所述的宿主細胞，其中，所述宿主細胞為大腸桿菌。
16.權利要求1-4任一項所述的甲基對硫磷水解酶突變體的應用，其應用于以甲基對硫磷等有機磷農藥為對象的家庭用果蔬農藥清洗劑。
17.權利要求1-4任一項所述的甲基對硫磷水解酶突變體的應用，其應用于以甲基對硫磷等有機磷農藥為對象的果蔬、茶葉和中藥原材料等加工過程的農藥去除劑。
18.權利要求1-4任一項所述的甲基對硫磷水解酶突變體的應用，其應用于以甲基對硫磷等有機磷農藥為對象的農藥去除的土壤修復劑。
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