[發明專利]一種從蠶沙中同時制備亞氨基糖及黃酮提取物的方法

有效

• 申請號: 201310713282.5
• 申請日: 2013-12-23
• 公開（公告）號: CN103641771A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 呂寒;李維林;陳劍;馬麗;任冰如;劉艷;梁呈元
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所
• 主分類號: C07D211/46
• 分類號: C07D211/46;A61K35/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明具體涉及一種從蠶沙中同時制備亞氨基糖及黃酮提取物的方法。

背景技術

蠶沙為家蠶(Bombyx?mori?L.)幼蟲蠶食桑葉后排泄出來的糞便。據測定，風干蠶沙中除含有9.9％的水份，還含有90.1％的干物質(含粗蛋白13.6％，粗脂肪3.7％，無氮浸出物48.7％，粗纖維12.5％，灰分12.6％)。蠶沙中含有18種氨基酸，其含量達到4.4％。

蠶沙中含有多種亞氨基糖類物質，如1-脫氧野尻霉素、fagomine、3-epi-fagomine，其中以1-脫氧野尻霉素含量最高，這類物質具有降血糖、抗病毒等作用。中國發明專利申請號為200910167602.5中公開了一種從蠶沙等中藥中分離高純度1-脫氧野尻霉素的方法，該方法需要將樣品通過陰離子交換樹脂純化后再經過陽離子交換樹脂進行純化，然后經過有機溶劑萃取、重結晶、凝膠柱層析純化得到高純度1-脫氧野尻霉素，該方法較繁瑣，而且所用萃取的有機溶劑氯仿毒性較大，且為易制毒試劑，不適合放大生產，且對環境會產生潛在污染。

蠶沙中還含有多種黃酮類成分，具有很強的生理活性。中國發明專利申請號為200910167602.5中公開了一種從蠶沙中制備粗黃酮的方法，采用陰離子交換樹樹脂對黃酮進行純化，但沒有說明所制備的粗黃酮的含量。

發明內容

本發明的目的是解決現有工藝中存在的缺陷，提供一種操作更為安全簡便、低成本，同時制備高含量亞氨基糖及黃酮提取物的方法。

為了達到上述目的，本發明提供了一種從蠶沙中同時制備亞氨基糖及黃酮提取物的方法，該方法包括以下步驟：

(1)用酸性水或酸性稀乙醇溶劑提取蠶沙，提取液過濾，濃縮；溶劑用量為蠶沙藥材量的5-10倍；

(2)取陽離子樹脂，將步驟(1)中得到的提取濃縮液上樣，用酸性水和水洗脫，收集酸性水洗脫液和水洗脫液，濃縮，得到酸性水和水洗脫合并濃縮液。再用稀氨水溶液洗脫，收集稀氨水洗脫液；

(3)取聚酰胺，將步驟(2)得到的酸性水和水洗脫合并濃縮液通過聚酰胺柱層析純化，上樣，分別用水、乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮干燥，得黃酮提取物；

(4)取氧化鋁，將步驟(2)所得的稀氨水洗脫液，濃縮至pH中性，通過氧化鋁層析柱純化，上樣，并用乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得亞氨基糖提取物。

其中，步驟(1)中提取方法為：每1千克蠶沙加入5-10L水或10-30％的乙醇，加鹽酸或硫酸調節pH1-4，80-100℃加熱提取2-4個小時，合并提取液，提取液過濾，濃縮。最佳提取方法為：每千克蠶沙加入8L的水溶液加鹽酸調節pH至1，80℃加熱提取2個小時，提取2次，過濾，合并提取液，濃縮。

步驟(2)取陽離子交換樹脂，樹脂與蠶沙的重量比為1∶1-1∶2，將步驟(1)中得到的提取濃縮液上樣，先采用pH范圍為1-3鹽酸或硫酸水溶液洗脫，至洗脫液色淺，再以水洗脫至pH中性，合并酸性水洗脫液和水洗脫液，濃縮，得到酸性水和水洗脫合并濃縮液。以0.1-0.3mol·L^-1氨水洗脫液洗脫，棄去洗脫液，再以0.4-1.0mol·L^-1氨水洗脫，收集0.4-1.0mol·L^-1氨水洗脫液。

最佳條件為：取與蠶沙的重量比為1∶1的001×7樹脂，將步驟(1)中得到的提取液上樣，先采用pH2鹽酸水溶液洗脫，至洗脫液色淺，再以水洗脫至pH中性，合并酸性水洗脫液和水洗脫液，濃縮，得到酸性水和水洗脫合并濃縮液。以0.3mol·L^-1氨水洗脫液洗脫，棄去洗脫液，再以0.4mol·L^-1氨水洗脫，收集0.4mol·L^-1氨水洗脫液。

步驟(3)取與步驟(1)中蠶沙的重量比為1∶1-1∶2的聚酰胺，將步驟(2)得到的酸性水和水洗脫合并濃縮液上樣，分別用水、10％-90％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮干燥，得黃酮提取物。

最佳條件為：取與步驟(1)中蠶沙的重量比為1∶1的聚酰胺，將步驟(2)得到的酸性水和水洗脫合并濃縮液上樣，分別用水、30％乙醇和70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，70％乙醇洗脫液濃縮干燥，得黃酮提取物。

步驟(4)取與步驟(1)中蠶沙的重量比為1∶0.5-1∶2的氧化鋁，將步驟(2)所得的氨水洗脫液濃縮至pH中性，上樣，并用10％-90％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，洗脫液濃縮干燥得亞氨基糖提取物。