[發(fā)明專利]金魚吻端細胞系及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310711835.3
• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN103710298A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發(fā)明（設計）人: 景宏麗;高隆英;張旻;張利峰;王娜;林祥梅;吳紹強;江育林
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/10;C12N7/00;C12R1/91
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

1.一種金魚吻端細胞系GS，其保藏號為CGMCC?No.8558。

2.根據權利要求1所述的金魚吻端細胞系GS，其特征在于，所述細胞系具有以下生物學特性：

（1）細胞呈現典型的上皮細胞形態(tài)，連續(xù)傳代培養(yǎng)50代仍保持該形態(tài)特點；

（2）細胞具有較強的增殖能力，連續(xù)培養(yǎng)50代仍保持該增殖和生長特性。

3.一種權利要求1所述的金魚吻端細胞系GS的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

（1）取金魚一條，用醫(yī)用酒精浸泡1-2min，于無菌條件下剪取金魚的吻端，放于濃度為1000u/ml的青霉素-鏈霉素雙抗溶液中；

（2）胰酶消化液消化10min，然后剪成小塊，用培養(yǎng)基重懸，離心，棄掉上清液，再用培養(yǎng)基進行重懸，離心，棄掉上清，最后加入培養(yǎng)基，重懸混勻；

（3）將步驟（2）制備的重懸混勻液加入到細胞培養(yǎng)瓶中，25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

（4）待細胞鋪板到1/3的時候，更換新鮮的培養(yǎng)基一次；

（5）待細胞鋪滿板子，用胰酶消化液進行初步消化后，加入新的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；

（6）傳代3次后，凍存，復蘇后能夠繼續(xù)穩(wěn)定增殖生長，該細胞系命名為GS。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基為含有濃度為100u/ml青霉素-鏈霉素雙抗溶液和20﹪特級胎牛血清的M199培養(yǎng)基。

5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述胰酶消化液的配制：磷酸氫二鈉2.3g，磷酸二氫鉀0.1g，氯化鈉8.0g，氯化鉀0.2g，EDTA0.2g，胰酶0.6g，水1000ml。

6.權利要求1所述的金魚吻端細胞系GS作為研究水產動物病毒宿主細胞的應用。

7.權利要求1所述的金魚吻端細胞系GS在水產動物病毒分離中的應用。