[發(fā)明專利]一種原始生殖細胞的爬片方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310702097.6 | 申請日: | 2013-12-19 |
| 公開(公告)號: | CN103674653A | 公開(公告)日: | 2014-03-26 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 于福先;潘建治;朱志偉;陳曉宇;黃菁 | 申請(專利權(quán))人: | 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號: | G01N1/28 | 分類號: | G01N1/28;G01N1/30 |
| 代理公司: | 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吳秉中 |
| 地址: | 310021 浙*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 原始 生殖細胞 方法 | ||
1.一種原始生殖細胞的爬片方法,其特征在于包括以下步驟:
1)對原始生殖細胞進行純化;
2)對純化后的原始生殖細胞采用PBS洗滌3次,離心收集細胞;
3)顯微鏡下揀取100~200個細胞置于載玻片上的PBS液滴中洗滌1次;
4)揀取細胞,置于載玻片上濃度4%的多聚甲醛溶液中洗滌1次;
5)揀取細胞,置于載玻片上的濃度4%的多聚甲醛液滴中固定10~30分鐘;
6)吸除濃度4%的多聚甲醛,細胞固定的同時完成細胞的爬片。
2.如權(quán)利要求1所述的一種原始生殖細胞的爬片方法,其特征在于所述的原始生殖細胞為禽類及哺乳動物類的PGCs細胞。
3.如權(quán)利要求1所述的一種原始生殖細胞的爬片方法,其特征在于所述的步驟1)中PGCs細胞采用Nycodenz密度梯度離心、Percoll密度梯度離心或流式分選方法進行純化。
4.如權(quán)利要求2所述的一種原始生殖細胞的爬片方法,其特征在于所述的步驟2)中離心條件200?g,5分鐘。
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