[發明專利]磚紅絨蓋牛肝菌試管子實體原基的誘導方法

有效

• 申請號: 201310701987.5
• 申請日: 2013-12-19
• 公開（公告）號: CN103609338A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 李宗菊;王鵬飛;張曦予;吳鵬;馮遼遼;趙昱;左奎
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種磚紅絨蓋牛肝菌試管子實體原基的誘導方法，屬于生物技術領域，具體地說是屬于野生食用菌室內培養范疇。

背景技術

牛肝菌隸屬于擔子菌門(Basidiomycota)，傘菌綱(Agaricomycetes)，牛肝菌目(Boletales)，牛肝菌科(Boletaceae)，為世界廣布大屬，是一類與植物共生的菌根真菌。該屬真菌味道鮮美，且含有抗氧化、抗腫瘤等生理活性物質，因而具有很高的經濟價值和研究前景。目前，除少數腐生種如暗褐網柄牛肝菌外，其絕大部分種仍難以進行人工栽培，市售子實體完全依賴野外采收。云南的自然資源豐富，野生牛肝菌品種多，但因近年氣候變化、生態破壞等原因其自然產量已經嚴重下降，導致售價昂貴。

磚紅絨蓋牛肝菌（Xerocomus?spadiceus(Fr.)?Quél.），在云南俗稱紅見手，為松樹外生菌根菌，目前不能人工培養。其夏季于林中地上單生或群生，子實體中等至大型，菌蓋直徑5～17cm，半球形至扁平，土紅色或磚紅色，菌肉黃白色，受機械損傷后變成藍色，菌柄長6～13cm，粗3～6cm，深玫瑰紅色或暗紫紅色，頂端有網紋，下部被絨毛，內實。磚紅絨蓋牛肝菌屬于一種名貴野生食用菌，其在云南分布廣，是云南省夏季市場上豐富多彩的主要美味菌類之一，由于全靠人工野外采摘，且個體生長受氣候、生態環境影響大（如遇長期干旱，幾乎不會生長），6月份剛上市時，其每千克鮮重售價在200～300元，在7～8月份產品較多時，價格也維持在90～150元，且食用期只有每年的6～9月，其它月份無自然產品。牛肝菌的干品味道較差，營養大大損失，人們很少食用。

因此，要保證牛肝菌能周年供應，滿足大眾餐桌所需，降低價格，只有實現人工培養。而牛肝菌的人工栽培，也像其它珍稀食用菌一樣，存在許多盲點，一方面，菌絲在培養基上生長很緩慢，另一方面，菌絲的生長發育與共生樹種的共生機理尚不完全清楚，因此至今仍沒有人工培養的品種。

本發明在菌絲誘導過程中，偶然發現，磚紅絨蓋牛肝菌能在試管中直接誘導子實體原基，改進培養條件，原基能進一步發育為完全的子實體。這為今后磚紅絨蓋牛肝菌大規模的室內人工培養奠定了重要基礎。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種直接、簡易、生產成本低，能在試管中直接誘導長出子實體原基的方法。

本發明的技術任務是，以野外采摘的子實體小組織塊為材料，在試管培養基上直接誘導分化子實體原基；

所述子實體小組織塊的準備及切取方法為：野外采摘生長健壯、無蟲害、未完全開傘、菌柄較粗壯、菌蓋較肥厚的成熟子實體；將子實體帶回實驗室，于超凈臺上用酒精棉球，輕擦菌蓋表面及菌柄部位，用解剖刀片輕輕去除菌蓋中部表皮，從菌蓋中部取十字，將子實體一分為四，取菌柄與菌蓋交接處的內部無菌組織塊，切成0.25～0.49cm²的小塊；

所述試管培養基成分為：馬鈴薯80.00～100g/L、酶解松針粉35～40?g/L、發酵玉米復合粉15～20?g/L、CaCl₂?1.00g?/L、KH₂PO₄0.60g/L、16.0波美的麥芽汁?80～90ml/L、瓊脂12.00?g/L，控制PH值為5.40～5.60；

所述培養基中酶解松針粉的制備方法如下：在牛肝菌生長地收集松針，烘干，粉碎；按1：4～1：6的重量體積比加入水，混成糊狀，用超聲波處理65～75min，再加入8～10倍水，調節PH值為4.0～4.6，于50～53℃水浴中，按6.0～7.0%的重量體積比加入纖維素酶，酶解120～140?min后，將水浴溫度升至92～95℃，至水分基本蒸干時移入73～75℃烘箱中，干燥30～32hr；所述發酵玉米復合粉的制備方法如下：將玉米面、小麥面、黃豆粉按2：1：1比例混合，按1：1～1：1.5的混合物重量體積比加入水，拌勻，在蒸鍋中蒸20～30分鐘，取出，待溫度冷至30～35℃時，按說明書摻入適量的酒曲粉，拌勻后放入干凈的瓷罐或泡菜罐中，密封好，放在28～30℃的培養箱中，發酵4～6天，將發酵物在55～60℃烘箱中烘干，粉碎，過80目分樣篩；