[發明專利]狹顱田鼠DNA序列

無效

• 申請號: 201310701606.3
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN103695546A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 張曉龍;姚李四;慈穎;喬舜;王海玲;房健慧;田麗;魏懷波
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/12;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種用于檢測狹顱田鼠的DNA標準基因，其特征在于該基因為COI基因，具有如SEQ?ID?NO：1所示的基因序列。

2.一種檢測權利要求1所述基因的引物，其特征在于該引物序列為：

正向引物5’ACTTCTGGGTGTCCAAAGAATCA3’；

反向引物5’CCTACTCRGCCATTTTACCTATG3’。

3.一種用于檢測狹顱田鼠的試劑盒，其特征在于包括權利要求2所述的引物。

4.狹顱田鼠的分子鑒定方法，包括：

1）從待測的鼠類肝臟中分離提取DNA；

2）以該DNA為模板，采用權利要求2所述引物進行擴增；

3）鑒定擴增所得序列，如果該序列與SEQ?ID?NO：1的同源性在98%以上，即可判斷所測田鼠為狹顱田鼠。

5.權利要求4所述的分子鑒定方法，其中步驟2）中：

采用聚合酶鏈式反應擴增模板。

6.權利要求4或5所述的分子鑒定方法，其中步驟3）中：

所述鑒定包括取適量步驟2）擴增出的產物用瓊脂糖電泳分離，經染色劑Goldview染色后于凝膠成像系統檢測，根據擴增產物的大小判定結果，如果能特異性擴增出720bp左右的條帶，則進行測序分析。

7.權利要求4或5所述的分子鑒定方法，其中擴增體系為：

8.權利要求4或5所述的分子鑒定方法，其中擴增反應程序為：

預變性94℃5min，35個循環，其中變性94℃30s、退火55℃40s、延伸72℃60s，最后延伸72℃10min。

9.權利要求6所述的分子鑒定方法，其中：

取5μL?PCR擴增產物，用1%瓊脂糖凝膠電泳，130V電壓，電泳35min，染色劑Goldview染色，凝膠成像系統檢測。

10.一種快速鑒定狹顱田鼠的方法，其特征在于：

采用傳統的形態學鑒定與權利要求4-9任一項所述的分子鑒定方法相結合。