[發明專利]一種白刺組培苗的培養方法

有效

• 申請號: 201310697008.3
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN103651143A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 張艷萍;趙瑋;羅俊杰;陳玉梁;羅萬銀;董治寶
• 申請（專利權）人: 甘肅省農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 牟彩萍

技術領域

本發明涉及組培育種領域，具體涉及一種白刺組培苗的培養方法。

背景技術

白刺別名沙櫻桃，俗稱地棗，根系發達，具有抗鹽堿、耐干旱、固沙改土的優良特性，是典型的沙旱生植物，在防風固沙、穩定沙漠、保護沙區綠洲中發揮著重要作用。白刺根寄生的鎖陽，為傳統名貴的溫補藥材。近年來，從野生植物資源中尋找新的、潛在的藥食同源植物，已成為國內外學者研究的熱點，而沙旱生植物白刺則是經過長期的自然篩選而保留下來的優勝者之一，白刺因其頑強的生命力和優良的遺傳基因而受到沙區人民的喜愛。白刺果含多種營養成分和豐富的微量元素，有調節血糖、血脂、降血壓，顯著提高人體免疫力、抗疲勞、抗寒冷、增進睡眠等功效，具有極高的營養和藥用價值。以它為優勢種和建群種構成的草地還是我國風沙干旱地區家畜重要的天然牧場。然而據調查表明，白刺有雄性不育現象，種間雜交混亂，變異大，種子繁殖品質退化相當嚴重，同時白刺種子存在高度休眠問題，栽培化程度低，這為人工大面積栽培和良種選育帶來了很大的困難。

采用組織培養快速繁殖技術可能是獲得優質、整齊白刺苗木的一條有效途徑，這對于合理開發和持續利用白刺資源有積極意義。目前，較多學者何正倫、孫雪新、郭曉紅等都進行過白刺的組培研究，所形成的再生體系中消毒劑用的是升汞。升汞對外植體的傷害較大，時間稍有不當就會造成消毒失敗，或者對外植體致死現象嚴重，這給后期工作造成困難。

發明內容

本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一種適宜白刺組培苗的經濟、簡便的培養方法。

為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為：一種白刺組培苗的培養方法，包括以下步驟：

1）外植體消毒：將白刺種子發芽得到的實生苗，剪取幼嫩莖段，消毒后用無菌水沖洗4-5次，得到消毒好的白刺莖段；

2）將步驟1）中消毒好的白刺莖段接種于MS培養基上，放于培養室培養，待其生根并拔節長高得到白刺無菌苗；

3）莖段快繁：將步驟2）得到的長高至4-5cm的白刺無菌苗切取帶芽莖段，接于生根培養基上，放于培養室培養，進行生根誘導；生根誘導過程為：將帶有頂芽的白刺無菌苗莖段直接接于MS培養基上進行生根培養，其余白刺無菌苗莖段接于1/2MS培養基+0.5mg/L吲哚乙酸上進行生根培養；培養室培養條件為溫度25±1℃，光照強度2000Lx，光照16h/d。

進一步的，上述的一種白刺組培苗的培養方法，所述步驟1）中，消毒過程為用75%酒精消毒30s，再用10%次氯酸鈉消毒15min-18min。

進一步的，上述的一種白刺組培苗的培養方法，所述步驟2）和步驟3）中，培養基MS和1/2MS，碳源使用的是白糖，配置培養基所用均為常用自來水。

進一步的，上述的一種白刺組培苗的培養方法，所用白刺為野生白刺。

進一步的，上述的一種白刺組培苗的培養方法，所述MS培養基和1/2MS培養基的配置組成為：

MS培養基：MS母液成分+30g白糖+0.1g肌醇+4.5g瓊脂粉，自來水定容配置；

1/2MS培養基：MS母液成分劑量減半+30g白糖+0.1?肌醇+4.5g瓊脂粉，自來水定容配置；

所述MS母液的組成成分以質量濃度計為：

大量元素：NH₄NO₃1650mg/L，KNO₃?1900?mg/L?，MgSO₄·7H₂O?370?mg/L，KH₂PO_4?170?mg/L；

微量元素：KI?0.83?mg/L，?H₃BO_3?6.2?mg/L，?MnSO₄·4H₂O?22.3?mg/L，?ZnSO₄·7H₂O?8.6?mg/L，?Na₂MnO₄·2H₂O?0.25?mg/L，?CuSO₄·5H₂O?0.025?mg/L，?CoCl₂·6H₂O?0.025?mg/L；

維生素：煙酸10?mg/L，鹽酸吡哆醇1?mg/L，鹽酸硫胺素1?mg/L；

鈣鹽：CaCl₂·2H₂O?440?mg/L；