[發(fā)明專(zhuān)利]一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310697008.3
• 申請(qǐng)日: 2013-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103651143A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張艷萍;趙瑋;羅俊杰;陳玉梁;羅萬(wàn)銀;董治寶
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京中恒高博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11249
• 代理人: 牟彩萍

1.一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）外植體消毒：將白刺種子發(fā)芽得到的實(shí)生苗，剪取幼嫩莖段，消毒后用無(wú)菌水沖洗4-5次，得到消毒好的白刺莖段；

2）將步驟1）中消毒好的白刺莖段接種于MS培養(yǎng)基上，放于培養(yǎng)室培養(yǎng)，待其生根并拔節(jié)長(zhǎng)高得到白刺無(wú)菌無(wú)菌苗；

3）莖段快繁：將步驟2）得到的長(zhǎng)高至4-5cm的白刺無(wú)菌苗切取帶芽莖段，接于生根培養(yǎng)基上，放于培養(yǎng)室培養(yǎng)，進(jìn)行生根誘導(dǎo)；生根誘導(dǎo)過(guò)程為：將帶有頂芽的白刺無(wú)菌苗莖段直接接于MS培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，其余白刺無(wú)菌苗莖段接于1/2MS培養(yǎng)基+0.5mg/L吲哚乙酸上進(jìn)行生根培養(yǎng)；培養(yǎng)室培養(yǎng)條件為溫度25±1℃，光照強(qiáng)度2000Lx，光照16h/d。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟1）中，消毒過(guò)程為用75%酒精消毒30s，再用10%次氯酸鈉消毒15min-18min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟2）和步驟3）中，培養(yǎng)基MS和1/2MS，碳源使用的是白糖，配置培養(yǎng)基所用均為常用自來(lái)水。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法，其特征在于：所用白刺為野生白刺。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種白刺組培苗的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述MS培養(yǎng)基和1/2MS培養(yǎng)基的配置組成為：

MS培養(yǎng)基：MS母液成分+30g白糖+0.1g肌醇+4.5g瓊脂粉，自來(lái)水定容配置；

1/2MS培養(yǎng)基：MS母液成分劑量減半+30g白糖+0.1?肌醇+4.5g瓊脂粉，自來(lái)水定容配置；

所述MS母液的組成成分以質(zhì)量濃度計(jì)為：

大量元素：NH₄NO₃1650mg/L，KNO₃?1900?mg/L?，MgSO₄·7H₂O?370?mg/L，KH₂PO_4?170?mg/L；

微量元素：KI?0.83?mg/L，?H₃BO_3?6.2?mg/L，?MnSO₄·4H₂O?22.3?mg/L，?ZnSO₄·7H₂O?8.6?mg/L，?Na₂MnO₄·2H₂O?0.25?mg/L，?CuSO₄·5H₂O?0.025?mg/L，?CoCl₂·6H₂O?0.025?mg/L；

維生素：煙酸10?mg/L，鹽酸吡哆醇1?mg/L，鹽酸硫胺素1?mg/L；

鈣鹽：CaCl₂·2H₂O?440?mg/L；

鐵鹽：FeSO₄·7H₂O?27.8?mg/L，?Na₂-EDTA·2H₂O?37.3?mg/L。