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[發明專利]一種吡拉西坦腦蛋白水解物片中的腦蛋白水解物及其制備方法有效

專利信息
申請號: 201310692429.7 申請日: 2013-12-17
公開(公告)號: CN103656607A 公開(公告)日: 2014-03-26
發明(設計)人: 郭智華 申請(專利權)人: 弘美制藥(中國)有限公司
主分類號: A61K38/01 分類號: A61K38/01;A61K35/30;A61P9/10;A61P25/00
代理公司: 北京元中知識產權代理有限責任公司 11223 代理人: 另婧
地址: 135000*** 國省代碼: 吉林;22
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 吡拉西坦腦 蛋白 水解 中的 及其 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種吡拉西坦腦蛋白水解物片中的腦蛋白水解物,其特征在于,所述的腦蛋白水解物是采用如下方法制備得到的:

1)取除人以外的哺乳動物的腦組織,自然緩化至無冰渣,剔除雜質,得到干凈的腦組織;

2)取干凈的腦組織進行勻漿,每次勻漿2~3分鐘,得到腦組織勻漿液;

3)向腦組織勻漿液中加入2.5~3.5倍體積的丙酮,攪拌25~35分鐘,靜置3.5~4.5小時,過濾,得丙酮渣;再向丙酮渣中加入1.5~2.5倍體積的丙酮,攪拌25~35分鐘,靜置3.5~4.5小時,過濾,濾渣在60~70℃下干燥3~5小時,得到腦蛋白粉;

4)取胰蛋白酶、無水氯化鈣用冷純化水溶解,配制成濃度為0.02%~0.04%g/ml的胰蛋白酶溶液,室溫下放置1~2小時活化;胃蛋白酶用冷純化水溶解,配制成濃度為0.02%~0.04%g/ml的胃蛋白酶溶液;

5)取腦蛋白粉,加入純化水,攪拌均勻,加熱至40~45℃,加入活化好的胰蛋白酶,攪拌均勻,控制溫度在40~45℃之間酶解3.5~4.5小時后,再加入胃蛋白酶,攪拌均勻,控制溫度在40~45℃之間酶解1.5~2.5小時,酶解結束,加熱至85~95℃、保溫25~35分鐘,然后降溫至20~30℃,得到酶解液;

6)將所得的酶解液用離心機離心15~25分鐘,收集上清液,過濾得到澄清液體,控制澄清液體的pH值至5.0~7.0;

7)將所得澄清液體進行濃縮、干燥、粉碎過篩,得到腦蛋白水解物干粉。

2.根據權利要求1所述的腦蛋白水解物,其特征在于,步驟4)中所述的無水氯化鈣的用量為胰蛋白酶用量的12~13wt%。

3.根據權利要求1所述的腦蛋白水解物,其特征在于,步驟5)中加入的活化好的胰蛋白酶的量為步驟2)的干凈的腦組織總重量的2~3wt%;加入的胃蛋白酶的量為步驟2)的干凈的腦組織總重量的0.5~1wt%。

4.根據權利要求1~3任意一項所述的腦蛋白水解物,其特征在于,步驟5)中所述的胃蛋白酶在加入前先進行超聲波預處理。

5.根據權利要求4所述的腦蛋白水解物,其特征在于,所述的超聲波預處理為以超聲功率為60~80W、超聲頻率為30~35kHz、超聲時間與間歇時間比為1:1的超聲波進行超聲波預處理8~12min。

6.一種權利要求1所述的吡拉西坦腦蛋白水解物片中的腦蛋白水解物的制備方法,其特征在于,所述的制備方法包括如下步驟:

1)取除人以外的哺乳動物的腦組織,自然緩化至無冰渣,剔除雜質,得到干凈的腦組織;

2)取干凈的腦組織進行勻漿,每次勻漿2~3分鐘,得到腦組織勻漿液;

3)向腦組織勻漿液中加入2.5~3.5倍體積的丙酮,攪拌25~35分鐘,靜置3.5~4.5小時,過濾,得丙酮渣;再向丙酮渣中加入1.5~2.5倍體積的丙酮,攪拌25~35分鐘,靜置3.5~4.5小時,過濾,濾渣在60~70℃下干燥3~5小時,得到腦蛋白粉;

4)取胰蛋白酶、無水氯化鈣用冷純化水溶解,配成濃度為0.02%~0.04%g/ml的胰蛋白酶溶液,室溫下放置1~2小時活化;胃蛋白酶用冷純化水溶解,配成濃度為0.02%~0.04%g/ml的胃蛋白酶溶液;

5)取腦蛋白粉,加入純化水,攪拌均勻,加熱至40~45℃,加入活化好的胰蛋白酶,攪拌均勻,控制溫度在40~45℃之間酶解3.5~4.5小時后,再加入胃蛋白酶,攪拌均勻,控制溫度在40~45℃之間酶解1.5~2.5小時,酶解結束,加熱至85~95℃、保溫25~35分鐘,然后降溫至20~30℃,得到酶解液;

6)將所得的酶解液用離心機離心15~25分鐘,收集上清液,過濾得到澄清液體,控制澄清液體的pH值至5.0~7.0;

7)將所得澄清液體進行濃縮、干燥、粉碎過篩,得到腦蛋白水解物干粉。

7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,步驟4)中所述的無水氯化鈣的用量為胰蛋白酶用量的12~13wt%。

8.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,步驟5)中加入活化好的胰蛋白酶的量為步驟2)的干凈的腦組織總重量的2~3wt%;加入胃蛋白酶的量為步驟2)的干凈的腦組織總重量的0.5~1wt%。

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