[發明專利]丙型肝炎病毒抗原抗體聯合檢測試劑盒及其檢測方法

有效

• 申請號: 201310692181.4
• 申請日: 2013-12-17
• 公開（公告）號: CN103630690A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 朱之煒;呂紅娟;歐蘭香;王佳穎;陳振;王巖;寇宗陽;丁興龍
• 申請（專利權）人: 山東萊博生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 王緒銀

技術領域

本發明屬免疫檢測技術領域，具體來說涉及一種丙型肝炎病毒（HCV）抗原抗體聯合檢測試劑盒及其檢測方法。

背景技術

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（hepatitis?C?virus,HCV）感染而引起的一種的全球性傳染病。據估計，目前全世界有1.7億丙肝病毒感染者，我國的丙肝感染率大約為3.2%，目前至少有4000－6000萬丙肝患者。丙型肝炎的慢性化發生率明顯高于乙型肝炎，且較乙型肝炎易早期出現肝硬化，導致肝癌,病死率較高，尤其是HCV的早期診斷對于篩查HCV的傳染源、指導臨床治療和預后判斷有重大意義。因此，有必要尋找一種簡易的、準確的、價格低廉的和可以普遍推廣的方法來實現對HCV的檢測，對發展中國家尤其如此。

HCV病毒屬于黃病毒科，其基因組為單股RNA，約9.4kb,易變異。HCV基因組由一個大的開放閱讀框（ORF）組成，編碼10余種結構和非結構（NS）蛋白。編碼一個3010～3033氨基酸的多聚蛋白，排列順序為5′UTR--C2--E1--E2--NS2--NS3--NS4--NS5--3′UTR,其中C為核心蛋白,E1和E2為囊膜蛋白,NS為非結構蛋白.NS5B蛋白是RNA依賴RNA聚合酶，為HCV復制所需，是抗病毒治療的重要靶位。在開放閱讀框上游有一個341個核苷酸的5’UTR區域是所有HCV基因型的基因組中最為保守的區域，不同基因型具有90%的相似性，已成為HCV分子診斷技術的研究焦點。

目前丙型肝炎的主要檢測方法均有一定局限性：

1、丙型肝炎抗體檢測：是現在使用最廣泛的檢測方法，但其缺點一是存在“窗口期”，HCV感染后至抗HCV抗體產生之前還有一段約40－70天的較長時期（平均66天），此時，獻血員已被感染并具有感染性，應用目前的抗體檢測試劑不能檢出，該階段稱為感染后血清陽轉前的窗口期（perseroconversion?window?phase,PWP）.PWP的存在是輸血安全的重要威脅之一，使受血者依然有經輸入抗HCV篩選陰性的血液而感染HCV的危險。目前丙型肝炎的輸血后感染占肝炎病例的70%，而在丙型肝炎感染者中更有80-90%是屬于輸血后感染，這在很大程度上鑒于上述原因。

2、HCV?RNA檢測：主要用于抗病毒治療的選擇與療效監測，但它需嚴格按PCR操作規程操作，檢測人員需經專業培訓并取得相應資質，且樣本的質量控制要求高，要求采血后2小時內低溫條件下送檢，無菌抽提RNA，容易因儀器、試劑、人員及環境等造成誤差，產生假陽性及假陰性。

3、丙肝抗原檢測：在HCV?RNA出現后的1-2d內即出現丙型肝炎病毒HCV抗原，且與HCV?RNA的水平相平行，可以作為HCV復制的標志。有研究表明，HCV抗原檢測與抗體檢測相比，HCV抗原的檢測可使檢測的窗口期平均提前49天，縮短窗口期HCV感染的風險。

丙肝抗原抗體聯合檢測試劑盒可用于HCV的血源篩查同時檢測丙肝抗原及抗體，既可提高用血及輸血安全，同時也提高了工作效率及節約成本；此外本試劑盒及其檢測方法可區分是HCV現癥感染還是既往感染，可用于HCV的早期檢測及治療評價，為指導臨床提供重要的檢測評價指標。

目前針對丙肝抗原抗體聯合檢測的相關專利如下：

（1）丙型肝炎病毒抗原抗體時間分辨免疫熒光分析法聯合檢測及檢測試劑盒（申請號：201210385472.4）。

（2）酶免疫分析法直接標記抗原檢測丙型肝炎病毒抗原抗體及檢測試劑盒（申請號：201210391183.5）。

（3）化學發光法直接標記抗原檢測丙型肝炎病毒抗原抗體及檢測試劑盒（申請號：201210376965.1）。

（4）一種丙型肝炎病毒抗原抗體聯合檢測的方法（申請號：200810143274.0）。

（5）Methods?for?the?simultaneous?detection?of?HCV?antigens?and?HCVantibodies(PCT/US02/19958).