[發(fā)明專(zhuān)利]丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310692181.4
• 申請(qǐng)日: 2013-12-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103630690A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱之煒;呂紅娟;歐蘭香;王佳穎;陳振;王巖;寇宗陽(yáng);丁興龍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東萊博生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/577
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/577;G01N33/531
• 代理公司: 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37219
• 代理人: 王緒銀

1.一種丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，包含如下組份：包被有HCV嵌合抗原及HCV單克隆抗體的微孔板、樣品稀釋液、酶工作液、底物A液、底物B液、20倍濃縮洗滌液及終止液，其特征在于：所述微孔板制備時(shí)用含有離子表面活性劑和還原劑的包被緩沖液包被，其中離子表面活性劑選自十二烷基氨基丙酸、十二烷基二甲基胺乙內(nèi)酯或溴化十六烷基三甲基銨（CTAB），還原劑選自半胱氨酸、二硫蘇糖醇（DTT）、還原型谷胱甘肽或β-巰基乙醇，所述樣品稀釋液是含有還原劑、小鼠IgG和蛋白沉降劑硫酸銨的溶液，其中還原劑選自半胱氨酸、二硫蘇糖醇（DTT）、還原型谷胱甘肽或β-巰基乙醇，所述酶工作液是包含有HCV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)酶工作液、HCV抗原檢測(cè)酶工作液和HCV抗體檢測(cè)酶工作液的三個(gè)獨(dú)立包裝。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述離子表面活性劑為溴化十六烷基三甲基銨（CTAB），使用濃度為0.01wt%～1.3wt%；所述還原劑為二硫蘇糖醇（DTT），使用濃度為0.01wt%～2wt%。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述離子表面活性劑為溴化十六烷基三甲基銨（CTAB），使用濃度為0.08wt%～0.5wt%；所述還原劑為二硫蘇糖醇（DTT），使用濃度為0.05wt%～1.0wt%。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述離子表面活性劑為溴化十六烷基三甲基銨（CTAB），使用濃度為0.1wt%；所述還原劑為二硫蘇糖醇（DTT），使用濃度為0.1wt%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述樣品稀釋液中的還原劑為半胱氨酸，使用濃度為20mM。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述樣品稀釋液中小鼠IgG的使用濃度為1mg/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述樣品稀釋液中蛋白沉降劑硫酸銨的使用濃度為25wt%。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述樣品稀釋液配方是：5mM?EDTA，1%BSA，1mg/ml小鼠IgG，1%SB-12、1%CTAB、1%Triton-X114，20mM的半胱氨酸，25%（NH₄）₂SO₄，2.5M?Urea，0.01Proclin300，1×PBS，PH5.8。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述酶工作液用如下配方的稀釋液稀釋?zhuān)?%山羊血清、1％硫柳汞、1%PVP、1%BSA、5%葡聚糖T2000、0.5%酪蛋白、10mg/ml慶大霉素、0.01M?pH7.4PBS。

10.權(quán)利要求1所述丙型肝炎病毒抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用，其特征在于：所述酶工作液中的HCV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)酶工作液、HCV抗原檢測(cè)酶工作液和HCV抗體檢測(cè)酶工作液三個(gè)獨(dú)立包裝，分別在聯(lián)合檢測(cè)HCV抗原和抗體、丙肝抗體及丙肝抗原檢測(cè)三種不同情境下使用。