[發明專利]血液樣品預處理方法

有效

• 申請號: 201310687036.7
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103645264A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 許驥;陳杰;陳銳勇;劉曉波;何佳;陳新;向導
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍海軍醫學研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張亞利;駱蘇華

1.一種血液樣品預處理方法，其特征在于，包括：

在試管中加入乙腈溶劑和血漿，血漿與乙腈溶劑的體積比大于等于1：3，血漿中的雜蛋白分離形成絮狀物，鎖鏈素附著在絮狀物中；

提取絮狀物；

在所述絮狀物中加入高效液相色譜級酸性水溶液，絮狀物中的鎖鏈素以離子形態游離在所述高效液相色譜級酸性水溶液；

提取具有鎖鏈素離子的高效液相色譜級酸性水溶液。

2.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，所述高效液相色譜級酸性水溶液為甲酸溶液或三氟乙酸溶液，所述甲酸溶液、三氟乙酸溶液的體積濃度范圍為0.5‰～1‰。

3.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，在提取所述絮狀物之前，對裝有乙腈溶劑和血漿的試管進行渦旋振蕩。

4.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，所述提取絮狀物的方法為：進行離心過濾處理，得到甩干的絮狀物，在所述離心過濾過程，離心機的轉速范圍為4000～5000rpm。

5.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，在所述絮狀物中加入高效液相色譜級酸性酸溶液后，靜置2～3min。

6.如權利要求5所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，靜置后，對裝有高效液相色譜級酸性水溶液的試管進行渦旋振蕩。

7.如權利要求3或6所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，所述渦旋振蕩的時間范圍為20～30s。

8.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，提取具有鎖鏈素離子的高效液相色譜級酸性水溶液的方法為：進行離心過濾處理，得到具有鎖鏈素離子的高效液相色譜級酸性水溶液，在所述離心過濾過程，離心機的轉速為10000rpm。

9.如權利要求4或8所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，所述離心過濾時間范圍為2～3min。

10.如權利要求1所述的血液樣品預處理方法，其特征在于，在所述血液樣品預處理方法中，使用的試管包括第一管、可分離套裝于第一管中的第二管，

所述第二管具有第一開口和第二開口，所述第一開口具有可橫亙在第一管開口邊緣的延伸件，乙腈溶劑、血漿和高效液相色譜級酸性水溶液通過第一開口進入第二管中；

所述第二管中設置有濾膜，所述濾膜表面與所述第一開口相對，所述濾膜邊緣與第二管內壁貼合，所述濾膜與第一開口之間的第二管部分用于盛裝乙腈溶劑、血漿和高效液相色譜級酸性水溶液；

提取絮狀物過程，使用濾膜過濾第二管中的溶液，第二管中的溶液流入一第一管，絮狀物沉積在濾膜表面；

在提取絮狀物后，分離第一管與第二管，將第二管套裝于另一第一管中；

提取具有鎖鏈素離子的高效液相色譜級酸性水溶液過程，具有鎖鏈素離子的高效液相色譜級酸性水溶液流入另一第一管。