[發明專利]通關藤藥材及制劑指紋圖譜的建立方法及應用

有效

• 申請號: 201310684459.3
• 申請日: 2011-05-18
• 公開（公告）號: CN103792308A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 王勇;李邇娜;錢金葉;欽松;沈振濤;張倉
• 申請（專利權）人: 南京圣和藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 張慧清

技術領域

本發明涉及一種中藥藥材及其制劑的質量控制方法，特別涉及通關藤藥材及其制劑高效液相色譜法指紋圖譜的建立方法，以及由此方法得到的通關藤藥材及其制劑的標準指紋圖譜。

背景技術

通關藤系蘿藦科(Asclep?iadaceae)牛奶菜屬植物通光散[Marsdenia?temacissima?(Roxb.)Wight?et?Arn]的干燥藤莖，又名烏骨藤、扁藤、下奶藤、黃木香、大苦藤等，始載于《滇南本草》，收載于1974年版《云南省藥品標準》、1977年版《中國藥典》及2010年版《中國藥典》。

通關藤味苦、性微寒、入肺、胃、膀胱經、有清熱解毒、止咳平喘，散結止痛，敗毒抗癌，祛風除濕，通氣利尿，活血生肌，催乳的功能。通關藤根、藤、莖、葉藥用，主治肺炎，支氣管炎、支氣管哮喘，咽喉炎，扁桃體炎，膀胱炎，疔瘡腫毒。治瘡瘍、咳喘、喉痛，胃痛。據《抗癌中藥方選》記載：“主治腫瘤如食道癌、賁門癌、胃癌、白血病、何杰金氏病、宮頸癌、肺癌等。兼治疾病如上呼吸道感染、支氣管炎、支氣管哮喘、小便不利”。

目前控制通關藤藥材質量的方法主要包括性狀鑒定、顯微鑒定、薄層鑒定、理化鑒定及含量測定等方法。含量測定主要通過利用分光光度法測定通關藤中甾體皂苷含量來達到控制通關藤藥材質量的目的。

發明專利CN100434088C公開了一種從通關藤中提取的靜脈給藥制劑，其制備工藝是將通關藤提取液制為浸膏，再向浸膏中加入藥用輔料成適合供靜脈滴注給藥的劑型，功能主治為清熱解毒、化痰軟堅、在臨床上主要用于食道癌、胃癌、肺癌、肝癌、并可配合放療、化療的輔助治療。

目前通關藤靜脈紅藥制劑的質量控制方法主要依據標準WS-10630(ZD-0630)-2002，主要檢測注射液中的總固體、pH、蛋白質、草酸鹽、樹脂、鞣制，鉀離子、熱源等，以及利用分光光度法測定注射液中總酚酸含量并將其作為注射液的質量控制指標。

甾體皂苷類成分是有文獻報導的公認的通并藤藥材及制劑的主要活性成分。然而通關藤藥材以甾體皂苷含量為質量控制的指標，而其注射液則以總酚酸含量為質量控制的指標，并且單一的某成分含量測定并不能完全反映藥材及注射液的整體特征、藥效作用，也不能很好的控制通關藤藥材及其注射液的質量。

發明內容

本發明涉及通關藤藥材及其制劑高效液相色譜法指紋圖譜的建立方法，以及由此方法得到的通關藤藥材及其制劑的標準指紋圖譜。通過測定通關藤藥材及其注射液的指紋圖譜有效地控制通關藤藥材及其注射液的質量，彌補了現有質量控制技術的不足，從而確保通關藤藥材及其注射液的有效性、安全性、穩定性和均一性。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：用高效液相色譜法建立通關藤藥材及其注射液的指紋圖譜，從而有效的控制通關藤藥材及其注射液的質量。具體包括如下步驟：

一、通關藤藥材的甾體皂苷類指紋圖譜建立方法及質量控制方法

1、通關藤藥材甾體皂苷類成分指紋圖譜的建立方法

(a)供試晶的制備：取通關藤藥材適量，粉碎，過篩，精密稱取藥材粉末1g，精密加入甲醇40ml，再稱重：40KHZ超聲提取10分鐘以上，自然冷卻，用甲醇補足重量，振搖混合均勻；過濾、取續濾液20ml揮干，殘渣用甲醇1ml溶解,經0.45μm微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。

(b)參照物溶液的制備：精密稱取Tenacissosides?A(由南京圣和藥業有限公司研究院植化室提供)12mg，置于50ml容量中，加甲醇溶解并稀釋至刻度、搖勻，參照物溶液即得。

Tenacissosides?A結構式為：

(c)色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱：流動相A為水，流動相B為乙腈，梯度洗脫：0～23min：75％A→65％A，25％B→35％：23～48min：65％A→50％A，35％B→50％B：48～60min：50％A→50％A，50％B→50％B：60～90min：50％A→20％A，50％B→80％B：90～100min：20％A→10％A，80％B→90％B：100～101min：10％A→75％A，90％B→25％B：101～120min：75％A→75％A，25％B→25％B：柱溫：35℃，流速：0.8ml/min。檢測器：蒸發光散射檢測器：霧化氣體流速：1.5-3.5L/min；漂移管溫度：50-115℃。