[發明專利]在體外生成可灌注微血管網絡的方法及設備以及在體外生成內皮親代血管的方法

在審

• 申請號: 201310682666.5
• 申請日: 2008-09-11
• 公開（公告）號: CN103725642A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: T·諾伊曼
• 申請（專利權）人: 諾荑思公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12M3/00
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 李婉婉;張苗

1.一種在體外生成可灌注微血管網絡的方法，所述方法包括：

從基質（1054）中撤出軸芯（2）以形成通過所述基質的通道（1010）；

將細胞（1）注入到所述通道中（1014）；

培育所述基質，以使細胞（1）附著到所述通道的內部（1016）；

灌注（1020）所述通道，以去除未附著的細胞（1）并在所述通道內生成親代血管（1022），其中，所述親代血管（1102）包括由所述基質（1054）中的細胞（1）襯里的可灌注的空通道；

誘導所述親代血管（1102），以生成進入周圍基質（1054）的萌芽（1106），以便形成微血管網絡（222）；以及

通過所述親代血管（1102）對所述微血管網絡（222）進行內腔灌注。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，通過多個軸芯（2）形成多于一個的通道，所述軸芯（2）含有毛細管（916）且至少兩個親代血管（1102）被誘導以生成吻合形成微血管網絡（222）的萌芽（1106）。

3.根據權利要求2所述的方法，其中，所述的至少兩個親代血管（1102）含有可灌注血管（222）的多維陣列。

4.根據權利要求1所述的方法，其中，灌注（1020）所述通道采用至少一種灌注液（204），該灌注液（204）含有：不含血清和促血管生成或抗血管生成物質的含氧細胞生長培養基；補充了血清的含氧細胞生長培養基；至少一種影響血管生成的化合物；含氧生理鹽水溶液；含氧血液、血液成分、血液替代品；不含氧而通過從所述基質擴散而實現系統充氧的灌注液；加入在灌注液中的促血管生成化合物和抗血管生成化合物中的至少一種；以及基質（1054）中含有的促血管生成化合物和抗血管生成化合物中的至少一種。

5.根據權利要求1所述的方法，其中，所述細胞（1）包括向灌注液（204）或所述基質（1054）中釋放產物的基因修飾的細胞（1）。

6.根據權利要求1所述的方法，其中，所述基質（1054）包括選自由纖維蛋白、膠原、明膠、凝膠的基底膜、瓊脂、瓊脂糖、藻酸鹽、基底膜蛋白、硅膠、細胞和它們的組合所組成的組中的材料。

7.根據權利要求1所述的方法，其中，通過選擇的能夠預先附著到所述軸芯（2）的至少一種方法，通過在撤出（1010）所述軸芯（2）之后注入（1012）至所述基質的通道中，以及通過預先附著到所述軸芯（2）和注入到所述基質中相結合的方法，將細胞（1）沉積到所述基質的通道中。

8.根據權利要求1所述的方法，其中，通過選自抽取（1010）和降解中的至少一種方法，從所述基質（1054）中去除所述軸芯（2）。

9.根據權利要求1所述的方法，其中，所述細胞（1）選自由內皮細胞、平滑肌細胞、外周細胞、人細胞、動物細胞、植物細胞、干細胞、肌細胞、肝細胞、腎細胞、肺細胞、皮膚細胞、上皮細胞、以及基因修飾的細胞所組成的組中。

10.根據權利要求1所述的方法，其中，所述細胞（1）位于所述基質（1054）中，所述細胞（1）選自由內皮細胞、平滑肌細胞、外周細胞、人細胞、動物細胞、植物細胞、干細胞、肌細胞、肝細胞、腎細胞、肺細胞、皮膚細胞、上皮細胞、以及基因修飾的細胞所組成的組中。

11.根據權利要求1所述的方法，其中，健康或病態組織的片段被植入到所述基質（1054）中。

12.根據權利要求1所述的方法，其中，癌組織的片段被植入到所述基質（1054）中。

13.根據權利要求1所述的方法，其中，通過減少流體向一個親代血管（202）的流入，并增加在通過一個或多個萌芽（220）與第一親代血管相接的第二親代血管（200）上的阻力，使流動的灌注液（204）通過所述毛細管（206）改道，從而驅動所述灌注液（204）從具有較高壓力的血管進入到具有較低壓力的血管。

14.根據權利要求1所述的方法，其中，所述微血管網絡（222）包括選自生物人工微血管（200）、專屬內皮細胞管（1102）和平滑肌細胞管中的一種。

15.根據權利要求1所述的方法，其中，所述微血管網絡（222）含有能夠向所述灌注液（204）中釋放因子的基因修飾的或正常的細胞（1）。