[發(fā)明專利]一種五倍子的乙酸乙酯提取物及其制備、檢測方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310680435.0
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN103690567A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳士林;黃林芳;王冬梅;林森森;卞兆祥;徐宏喜;楊大堅;陳新滋
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所;香港浸會大學(xué)
• 主分類號: A61K35/64
• 分類號: A61K35/64;G01N30/02;G01N30/36;A61P35/00
• 代理公司: 上海三方專利事務(wù)所 31127
• 代理人: 吳干權(quán);錢品興

[技術(shù)領(lǐng)域]

本發(fā)明涉及五倍子提取物及其制備、檢測方法和應(yīng)用，具體涉一種五倍子的乙酸乙酯提取物及其制備、檢測方法和應(yīng)用。

[背景技術(shù)]

表皮生長因子受體(EGFR)是EGFR酪氨酸激酶家族的成員之一，它包含有一個細(xì)胞外配體結(jié)合區(qū)、單一的跨膜區(qū)和一個含酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)的胞內(nèi)區(qū)。EGFR與配體結(jié)合導(dǎo)致重要的構(gòu)象變化，暴露受體中的二聚環(huán)結(jié)構(gòu)，引發(fā)自身磷酸化，轉(zhuǎn)導(dǎo)下游信號，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移、存活和一系列復(fù)雜的過程。EGRF在腫瘤細(xì)胞中常處于過度激活狀態(tài)，使細(xì)胞周期失去調(diào)控，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞無限制生長,如神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、頭頸部鱗癌、宮頸癌、食管癌、前列腺癌、肝癌、結(jié)腸癌、胃癌等。EGFR是目前抗腫瘤分子靶向治療中，最成功也是最受關(guān)注的治療靶點(diǎn)之一。FDA已批準(zhǔn)兩種靶向EGFR的小分子抑制劑，gefitinib(吉非替尼，易瑞沙)和erlotinib(厄洛替尼，特羅凱)，隨著時間的推移，在治療中出現(xiàn)了耐藥現(xiàn)象。而國內(nèi)迄今為止，尚未有特異性EGFR抑制劑出現(xiàn)。

五倍子，漆樹科植物鹽膚木Rhus?chinensis?Mill.、青麩楊Rhus?potaninii?Maxim.或紅麩楊Rhus?punjabensis?Stew.var.sinica(Diels)Rehd.et?wils.葉上的蟲癭，主要由五倍子蚜Melaphis?chinensis(Bell)Baker寄生而形成。具有斂肺降火、澀腸止瀉，斂汗，止血，收濕斂瘡的作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，五倍子具有以下藥理作用：

1、抗菌作用：五倍子水提液能夠減少牙齦卟啉菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)人單核細(xì)胞膜表面CD14的表達(dá)，有助于對牙周病的防治；五倍子水、乙醇提取物對變形鏈球菌Ingbritt株、茸毛鏈球菌均有較強(qiáng)作用。

2、抗病毒作用：五倍子煎劑具有很強(qiáng)的抑制HIV-Rt活性。

3、清除自由基和抗氧化作用：五倍子水煎劑有對老鼠抗衰老的作用；五倍子提取物能夠抑制突變作用。

4、抗癌作用：五倍子提物對PGG具有抗癌作用；五倍子的醇浸提液具有治療早期宮頸癌的作用。

迄今為止，尚未有關(guān)于五倍子的乙酸乙酯提取物及其相關(guān)應(yīng)用于一直EGFR活性的報道。

[發(fā)明內(nèi)容]

為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)尚無用五倍子乙酸乙酯提取物用于制造抑制EGFR活性的藥物的空白，本發(fā)明提供了五倍子的乙酸乙酯提取物及其制備方法、檢測方法和用途。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，設(shè)計一種五倍子的乙酸乙酯提取物的方法，其特征在于該方法由以下步驟組成：

a.將五倍子加入到石油醚中浸泡12～48小時，每100g五倍子需要300～500毫升的石油醚，然后滲濾回收殘渣；

b.所述的殘渣用濃度為60%～90%的乙醇分2～3次提取，每100克殘渣每次需要300～500毫升的乙醇，每次提取的時間是1～3小時，收集得到提取液；

c.所述的提取液進(jìn)行濃縮得到濃縮液；

d.用與濃縮液等體積的乙酸乙酯對所述的濃縮液進(jìn)行萃取，收集乙酸乙酯的萃取液；

e.蒸干所述的萃取液得到提取物。

每100g五倍子需要300毫升的石油醚浸泡。

所述的浸泡時間為18～36小時。

所述的乙醇濃度為70～90%。

所述的浸泡時間為24小時，每100克殘渣每次需要300毫升的乙醇，所述的乙醇濃度為80%，所述的步驟（b）中的提取次數(shù)為2次。

本發(fā)明還包括一種用上述方法提取的五倍子的乙酸乙酯提取物，其特征在于該提取物含有主要成分：石榴皮鞣素，香草醛，六羥基二苯酰胺葡萄糖，鞣花單寧，楊梅苷，原兒茶素，五倍子單寧倍酰葡萄糖，五倍子單寧,鞣花酸,3,5-二咖啡酰奎寧酸，Monogalloyl-glucose。

本發(fā)明還包括一種藥物制劑，由所述的五倍子的乙酸乙酯提取物和藥學(xué)上可接受的載體組成。

所述制劑為片劑、膠囊、顆?；蛲鑴?。

所述藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，選自填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、潤濕劑、溶劑、表面活性劑或矯味劑中的一種或幾種。

所述填充劑選自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素或葡萄糖等；

所述粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、淀粉、糊精、明膠或聚乙烯吡咯烷酮等；

所述崩解劑選自微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙基纖維素或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；

所述潤滑劑選自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸鈣、碳酸氫鈉、微粉硅膠、滑石粉或硬脂酸鎂；