[發明專利]脂肪干細胞庫構建方法有效
| 申請號: | 201310675417.3 | 申請日: | 2013-12-13 |
| 公開(公告)號: | CN103651331A | 公開(公告)日: | 2014-03-26 |
| 發明(設計)人: | 張炳強;于麗;張福琴;孫月光;孫弘 | 申請(專利權)人: | 青島中天干細胞工程有限公司 |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02;C12N5/0775 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266000 山東省青島市*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 脂肪 干細胞 構建 方法 | ||
1.一種脂肪干細胞庫構建方法,包括以下步驟:
(1)、采集脂肪:對供者進行HLA分型檢測、ABO/Rh血型檢測、人源特定病毒包括HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、CMV的檢測、梅毒螺旋體感染檢測,然后對符合要求的供者在無菌場所采集脂肪;
(2)、用含青霉素和鏈霉素的PBS反復沖洗脂肪組織,去除殘留的血液,將脂肪組織絞碎為0.5~1mm3的脂肪組織微塊;
(3)、收集脂肪組織微塊,在700g離心10min;
(4)、吸棄下層少量液體,將脂肪組織微塊用二甲基亞砜和血清替代品按照1:9的比例混合的凍存液重懸;
(5)、將重懸的脂肪組織微塊分裝到凍存管中,放入凍存盒,-80℃冰箱過夜,次日轉移到液氮保存;
(6)、按照供者HLA分型、ABO/Rh血型和性別進行保存,建立可供檢索的細胞信息檔案,即完成脂肪干細胞庫的構建。
2.根據權利要求1所述的脂肪干細胞庫構建方法,其特征在于:步驟(1)的脂肪采集量為10ml以上。
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