[發明專利]離子色譜法測定甲磺酸甲酯含量的方法及應用

有效

• 申請號: 201310672837.6
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN103728404A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 陳梅蘭;孫營營
• 申請（專利權）人: 浙江樹人大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

技術領域

本發明涉及一種測定甲磺酸甲酯的新方法，特別是離子色譜法測定甲磺酸甲酯含量的方法及應用。?

背景技術

甲磺酸甲酯(methylmethanesulfonate，MMS)是一種能夠損傷DNA的烷化劑，主要使嘌呤堿基上的氮、氧原子發生甲基化，導致DNA雙鏈斷裂、點突變。所以甲磺酸甲酯是一種直接致突變物，具有致癌性，對甲磺酸甲酯準確的測定具有非常重要的意義，尤其是在藥物中的含量。目前測定甲磺酸甲酯的方法主要有液相色譜-質譜法和氣相色譜質譜法，但是這兩種方法的操作都比較繁瑣，尤其是氣相色譜-質譜聯用技術不僅操作繁瑣，檢測成本也很高。?

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明提供了離子色譜法測定甲磺酸甲酯含量的方法及應用。?

一種離子色譜法測定甲磺酸甲酯含量的方法，甲磺酸甲酯在堿性條件下加熱水解生成甲磺酸和甲醇，以電導檢測器為檢測手段，經過陰離子交換柱分離后經過抑制器，然后通過檢測甲磺酸的含量從而得到甲磺酸甲酯的含量。?

一種所述的方法測定齊多夫定中的甲磺酸甲酯含量，步驟如下：?

1)標準溶液的配制：稱取甲磺酸0.1g置于10mL的容量瓶中，加入去離子水定容；?

2)淋洗液配制：6.3mmol／LNaHCO₃和1.7mmol／LNa₂CO₃的混合液；?

3)標準曲線制作：采用逐級稀釋的方法配制不同濃度標準溶液色譜進樣分析，得線性回歸方程為Y＝8.71781X-1.77812，線性相關系數R＝0.9994；?

4)甲磺酸甲酯的前處理：稱取甲磺酸甲酯0.1g置于10mL的容量瓶中，加入2mL甲醇待甲磺酸甲酯溶解后加入去離子水定容置刻度；甲磺酸甲酯的水解條件為：pH值為10、水解溫度為80℃、水解時間為15min；?

5)測定：淋洗液由泵輸送流經陰離子交換柱，所述的步驟4)中甲磺酸甲酯水解后的產物進入分離系統，在陰離子交換柱上被分離，流經抑制器，最后進入檢測器檢測后得色譜峰，對色譜峰面積處理后得實驗數據；?

6)實際樣品的測定：用所述的步驟4)中樣品前處理的方法將齊多夫定水溶液配制好，進行?水解，水解液色譜進樣；進樣量：30μL，泵的流速為0.5mL／min。?

水解后的甲磺酸在0.5—10mg／L的范圍內具有線性關系，線性相關系數為0.9994，檢出限為0.10mg／L，加標回收率為92.06％-97.28％，相對標準偏差(RSD)0.80％。?

一種所述的方法的應用，應用于食品、環境、藥代動力學分析領域的能夠完全水解的酯類物質。?

本發明的有益效果：?

本發明首次利用離子色譜法對甲磺酸甲酯進行檢測，甲磺酸甲酯在堿性條件下能夠完全水解，將甲磺酸甲酯在最佳的水解條件(最佳的pH值、溫度和水解時間)水解后，利用離子色譜儀對溶液進行分離檢測；本方法所需儀器設備簡單，成本低廉，避免了使用色譜-質譜聯用技術，大大的簡化了操作過程，降低了成本。本方法的整體穩定性，重現性理想，測定數據準確可靠，可以廣泛應用于生物制藥、藥代動力學研究、食品安全等領域。目前國內外尚無關于離子色譜法測定甲磺酸甲酯的報道。?

附圖說明

圖1是甲磺酸標準品的離子色譜圖(0.05mmol／L)；?

圖2是甲磺酸甲酯隨pH值變化的水解曲線圖；?

圖3是甲磺酸甲酯隨水解時間變化的水解曲線圖；?

圖4是甲磺酸甲酯隨溫度變化的水解曲線圖；?

圖5是0.05mmol／L甲磺酸甲酯(在最佳水解條件下水解后)色譜圖。?

具體實施方案

下面結合實施例對本發明做進一步具體說明。?

離子色譜法測定齊多夫定中甲磺酸甲酯的含量：?

具體步驟如下：?

1、標準溶液的配制：精確稱取甲磺酸0.1g置于10mL的容量瓶中，加入去離子水定容至刻度；精確稱取甲磺酸甲酯0.1g置于10mL的容量瓶中，加入適量甲醇待甲磺酸甲酯全部溶解后加入去離子水定容至刻度；?

2、標準曲線制作：采用逐級稀釋的方法配制不同濃度標準溶液；?

3、樣品前處理：精確稱取齊多夫定10mg置于10mL的容量瓶中，加入去離子水溶解、定容至刻度，在溫度80℃、pH值10、時間15min進行水解。?