[發明專利]重組酶基因bet作為一種大腸桿菌異源蛋白表達融合標簽的應用

有效

• 申請號: 201310669870.3
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN103667331A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 尚廣東;凌文;張青;駱希;楊瑤
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: C12N15/70
• 分類號: C12N15/70
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.來源于lambda噬菌體的重組酶基因bet作為異源基因在大腸桿菌內進行蛋白表達的融合標簽的用途。

2.一種在大腸桿菌內進行蛋白表達方法，其特征在于，以來源于lambda噬菌體的重組酶基因bet作為融合標簽；具體是將六個組氨酸、bet基因、TEV酶切位點和一段填充片段元件的核苷酸序列融合后，克隆至大腸桿菌表達載體pET30a(+)，獲得bet基因融合表達載體pLS2723；待表達的目的基因通過取代填充片段而與六個組氨酸和bet基因在讀碼框內融合；重組克隆轉化大腸桿菌表達宿主菌BL21(DE3)后，在異丙基-β-D-硫代半乳糖苷誘導下表達標簽蛋白和目的蛋白相融合的蛋白。

3.一種用于權利要求1所述用途的融合表達載體，是將六個組氨酸、bet基因、TEV酶切位點和填充片段克隆至大腸桿菌表達載體pET30a(+)而獲得。