[發(fā)明專利]靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310667677.6
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN103623416A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙秀麗;臧新龍;陳大為
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽藥科大學(xué)
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K45/00;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 沈陽杰克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 21207
• 代理人: 李宇彤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物及其制備方法和應(yīng)用，具體地涉及靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物在藥物傳遞系統(tǒng)中同時運載抗癌多肽和基因/化療藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康的疾病。癌癥治療是目前世界性難題。化療作為臨床治療癌癥的重要手段，已成為目前臨床治療惡性腫瘤最直接有效的方法之一。然而由于化療藥物的高毒性和重復(fù)使用易誘導(dǎo)腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生多藥耐藥性（Multi-Drug?Resistance，MDR），嚴重影響著臨床化療效果，90%以上腫瘤死亡患者都與不同程度的耐藥相關(guān)。逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的耐藥性，提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，對腫瘤治療意義重大。

MDR的產(chǎn)生和多藥耐藥基因編碼的P-gp（P-glycoprotein）膜蛋白等外排蛋白和Bcl-2等抗凋亡蛋白過度表達有關(guān)。有研究顯示，下調(diào)或阻斷MDR表達可顯著增強腫瘤細胞的化療敏感性，逆轉(zhuǎn)多藥耐藥。針對腫瘤細胞耐藥基因的siRNA干擾技術(shù)在體外細胞水平取得了較好的較果，RNA干擾技術(shù)具有高效、低毒、特異性強的特點，其中TKM-PLK1、ALN-VSP和Atu027的siRNA均已進入I期臨床用于實體腫瘤治療。利用siRNA技術(shù)沉默MDR耐藥基因，抑制相關(guān)蛋白表達，聯(lián)合化療藥物是提高腫瘤對化療藥物敏感性最有效的手段之一。

近年來，聯(lián)合化療藥物/基因藥物共輸送（co-delivery）用于腫瘤治療策略逐漸引起人們的關(guān)注。已有明確實驗證據(jù)表明化療藥物與基因藥物聯(lián)合應(yīng)用可以依據(jù)二者對腫瘤細胞作用部位和作用機制不同實現(xiàn)對腫瘤細胞協(xié)同殺傷和增殖抑制的功能，補充單純化療藥物作用靶點單一的不足，減小化療藥物劑量，降低毒副作用。陽離子脂質(zhì)體在所有已用于臨床試驗的基因載體中僅次于病毒載體居第二位，是最有發(fā)展前景的非病毒載體，特別適用于帶負電荷的DNA/RNA和親水性/或疏水性化療藥物的共輸送。然而陽離子脂質(zhì)體用于共輸送傳遞載體在應(yīng)用上仍面臨問題，主要表現(xiàn)在：（1）對病灶部位微環(huán)境響應(yīng)能力不強，影響藥物遞送效率。（2）組織選擇性不理想，缺少只針對腫瘤細胞的特異性靶點。如何提高載體的靶向效率及其遞送效率，探尋新型的特異性靶點，最終實現(xiàn)理想靶向藥物傳遞，是腫瘤靶向共輸送藥物載體設(shè)計面臨的重要科學(xué)問題。基于目前載體存在的關(guān)鍵問題，迫切需求新型靶向共輸送藥物傳遞載體。

采用同時具有PEG鏈的引入不影響共輸送藥物的包載、主動靶向至腫瘤組織、受腫瘤微環(huán)境觸發(fā)脫去PEG長鏈、入胞前電荷反轉(zhuǎn)為帶正荷等多重功能于一身的共輸送藥物載體未見諸于國內(nèi)外相關(guān)文獻報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于提供一種靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物。

本發(fā)明同時提供了靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物的制備方法和在靶向納米遞藥系統(tǒng)中的應(yīng)用。該系統(tǒng)通過復(fù)合機制介導(dǎo)，將具有特異靶向識別、信號傳導(dǎo)阻斷、pH觸發(fā)斷裂引起電荷反轉(zhuǎn)、逆轉(zhuǎn)MDR、能同時包載化療藥物或診斷藥物和基因藥物等復(fù)合機制介導(dǎo)自組裝共輸送藥物傳遞納米遞藥系統(tǒng)。

本發(fā)明的納米遞藥系統(tǒng)能夠?qū)⒒蛩幬锖突熕幬锿瑫r遞送到靶細胞內(nèi)，并通過靜脈注射給藥途徑發(fā)揮協(xié)同治療癌癥的作用。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

本發(fā)明的靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物的結(jié)構(gòu)式為R-PEG-Z–R₁，其中R代表甲基、anti-EphA10抗體、小分子配體、多肽配體和核酸適體中的一種,優(yōu)選抗EphmAb、葉酸、甘草次酸、RGD、生物素；

Z代表各種pH敏感鍵，主要為腙鍵、乙烯醚鍵、二硫鍵、酯鍵、原酸酯鍵、縮酮鍵、酰胺鍵，為以下結(jié)構(gòu)中的一種：

R₁膽固醇、α-生育酚的一種，為以下結(jié)構(gòu)的一種：

其中PEG分子量范圍2000-5000。

本發(fā)明分三步合成了靶向配體-PEG-膽固醇/生育酚衍生物：

①靶向配體-PEG衍生物的合成。

靶向配體-PEG衍生物包括：“anti-EphA10抗體-PEG衍生物”、“小分子配體-PEG衍生物”、“多肽配體-PEG衍生物”、“核酸適體-PEG衍生物”。其結(jié)構(gòu)式為R-PEG-X，其中R代表甲基、anti-EphA10抗體、小分子配體、多肽配體和核酸適體中的一種。X代表功能基團，具體是指羥基、巰基、羧基、磺酸基、氨基、酰氯、酸酐、醛基和馬來酰亞胺等中的一種。