[發明專利]一種快速鑒別中間型高溫放線菌的特異PCR方法

有效

• 申請號: 201310667412.6
• 申請日: 2013-12-11
• 公開（公告）號: CN103614485A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 程池;趙紀文;姚粟;信春暉;李輝;劉勇;張明娟
• 申請（專利權）人: 中國食品發酵工業研究院;山東扳倒井股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種中間型高溫放線菌的快速鑒別方法，其特征在于：經過簡單的PCR反應，可以快速鑒別中間型高溫放線菌。

2.按照權利要求1所述的中間型高溫放線菌快速鑒別方法，其特征在于：用于鑒別中間型高溫放線菌的特異引物為：

上游引物78F：5'-TTGTCCACGTGGTTGTCG-3'

下游引物618R：5'-TACGTCATCCCCGGTCAG-3'。

3.按照權利要求2所述的中間型高溫放線菌快速鑒別方法，其特征在于：PCR反應體系為50?μl，其中10×Taq?reaction?buffer?5.0?μL，引物（10μmol/L）各1.0?μl，10?μmol/L?的dNTP?4.0?μL，2.5U的Taq酶0.6?μL，DNA模板1.0?μL，dd?H₂O?37.4?μL。

4.按照權利要求3所述的中間型高溫放線菌快速鑒別方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應條件分別為：

78F/618R：95℃預變性5?min，進入循環：94℃變性30s，52℃復性30s，72℃延伸80s，共35個循環，然后72℃延伸10min。

5.按照權利要求4所述的中間型高溫放線菌快速鑒別方法，其特征在于：PCR擴增產物采用1%的瓊脂糖凝膠進行檢測。

6.按照權利要求5所述的中間型高溫放線菌快速鑒別方法，其特征在于：在576?bp處有電泳條帶的菌株為中間型高溫放線菌。