[發明專利]一種肝癌早期診斷試劑盒及檢測方法在審
| 申請號： | 201310657777.0 | 申請日： | 2013-12-09 |
| 公開（公告）號： | CN103675285A | 公開（公告）日： | 2014-03-26 |
| 發明（設計）人： | 段升華 | 申請（專利權）人： | 中山奈德生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/577 | 分類號： | G01N33/577 |
| 代理公司： | 中山市銘洋專利商標事務所(普通合伙) 44286 | 代理人： | 鄒常友 |
| 地址： | 528437 廣東省中山市火*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 肝癌 早期 診斷 試劑盒 檢測 方法 | ||
1.一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的診斷試劑盒組成如下：酶標多肽抗體,包被緩沖液,清洗液,顯色液,封閉液,終止液和抗原包被的酶標板。
2.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的酶標多肽抗體具體制備方法為：
（1）以合成肽Rep5為抗原免疫BALB/c小鼠，BALB／c小鼠，采用常規雜交瘤技術制備單克隆抗體，并制備小鼠腹水抗體，通過Pmtein?G柱將腹水抗體進行親和純化；
（2）采用辣根過氧化酶標記抗體。
3.根據權利要求2所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的小鼠腹水抗體效價為1：2000000-1：5000000。
4.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的包被緩沖液為PBS緩沖液。
5.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的清洗液為含有0.05%-0.1%Tween?20的PBS溶液。
6.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的顯色液為TMB顯色液。
7.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的封閉液為The?Blocking?Solution封閉液。
8.根據權利要求1所述的一種肝癌早期診斷試劑盒，其特征在于，所述的終止液為2-3mol/L的硫酸。
9.采用如權利要求1-8任一所述的試劑盒進行檢測的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
（a）在抗原包被的酶標板中加入封閉液200-300ul，37℃靜置10-15min；棄封閉液，采用清洗液清洗3-5次；
（b）加入100-200ul的酶標多肽抗體，37℃靜置10-15min，棄酶標多肽抗體，采用清洗液清洗3-5次；
（c）加入100-200ul顯色液，37℃避光孵育10-15min顯色；
（d）加入50-100ul終止液終止反應；
（e）采用酶聯檢測儀測定吸光度值。
10.根據權利要求9所述的檢測方法，特征在于，吸光度值的測定波長為455nm。
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