[發(fā)明專利]乙型肝炎表面抗原測定試劑盒以及檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310652173.7
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN103630531A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發(fā)明（設計）人: 陳秀發(fā);胡慶鋒;常立峻;徐海偉;李勇
• 申請（專利權）人: 蘇州長光華醫(yī)生物醫(yī)學工程有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林

1.一種乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，包括試劑M、試劑R1、試劑R2以及校準品，所述試劑M中組分包括親和素包被磁微粒，所述親和素包被磁微粒經(jīng)診斷試劑防腐劑處理；所述試劑R1中的組分包括生物素化Anti-HBs、磷酸鹽緩沖液以及診斷試劑防腐劑；所述試劑R2中的組分包括吖啶酯標記的Anti-HBs、磷酸鹽緩沖液以及診斷試劑防腐劑；所述對照組包括人源性乙肝表面抗原、新生牛血清以及診斷試劑防腐劑。

2.根據(jù)權利要求1所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，所述親和素包被磁微粒的親和素為鏈霉親和素、中性親和素或類親和素，所述親和素包被磁微粒中的磁微粒是以四氧化三鐵為內核表面包裹活性基團的聚合物，所述磁微粒的直徑為1.5um。

3.根據(jù)權利要求1所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，試劑R1和試劑R2中所述磷酸緩沖液的濃度均為0.01M，pH值為7.4。

4.根據(jù)權利要求1所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，所述診斷試劑防腐劑為0.1%的Proclin300防腐劑。

5.根據(jù)權利要求1所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R1的量為6ml，所述試劑R2的量為12ml，所述試劑M的量為3ml。

6.根據(jù)權利要求1所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒，其特征在于，所述校準品包括校準品1和校準品2兩組，所述校準品1的量為0.5ml，HBsAg濃度為0.1?IU/ml，所述校準品2的量為0.5ml，HBsAg濃度為30?IU/ml。

7.一種使用權利要求1-6所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括以下幾步：

（1）在將待測樣品和含有生物素化Anti-HBs的試劑R1進行反應，形成含有抗原-抗體復合體的反應液1；

（2）在反應液1中加入含有親和素包被磁微粒的試劑M，反應液1中的復合體在生物素和親和素的相互作用下形成固相，得到了反應液2；

（3）反應液2置于一個磁場內，檢測其中的磁微粒將被吸附，通過洗滌液洗滌，將未結合物沖洗除去，得到反應液3；

（4）在反應液3中加入含有吖啶酯標記的Anti-HBs的試劑R2，吖啶酯標記的Anti-HBs與磁微粒上的HBsAg復合物反應，得到反應液4；

（5）將反應液4置于化學發(fā)光測定儀上進行檢測，在磁場中磁微粒將被吸附，通過洗滌液洗滌，將未結合物沖洗除去；然后，注入化學發(fā)光激發(fā)液1及化學發(fā)光激發(fā)液2，檢測其化學發(fā)光光子強度；產生的光強度與樣本內乙型肝炎表面抗原濃度成正比。

8.根據(jù)權利要求7所述的乙型肝炎表面抗原測定試劑盒的檢測方法，其特征在于，所述化學發(fā)光激發(fā)液1中含有過氧化氫，所述化學發(fā)光激發(fā)液2中含有氫氧化鈉，所述洗滌液含有磷酸鹽緩沖液。