[發(fā)明專利]一株產油內生真菌Salicorn5及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310649131.8
• 申請日: 2013-12-03
• 公開（公告）號: CN103740598A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設計）人: 辛志宏;趙育卉;王惠;王曉敏
• 申請（專利權）人: 南京農業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/64;C12P33/00;C12R1/645
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

技術領域

本發(fā)明屬于食品生物技術領域，涉及一株產油內生真菌Salicorn5及其應用。?

背景技術

鹽生海蘆筍俗稱海蓬子或海豆，學名鹽角草，海蘆筍(Salicornia?bigelovii)，是一種鮮美多汁、口感咸脆的綠色海水蔬菜，多生長在鹽度較高的海灘、鹽湖等地。由于生活在高鹽環(huán)境中，這些嗜鹽菌在長期進化過程中形成獨特的代謝機制，能夠產生結構新穎的次級代謝產物，在食品、生物制藥、化工等領域具有潛在的應用價值，也為尋找有價值的高產油脂菌株提供新的途經。?

油脂是構成和維持生命活動的基本物質，也是重要的工業(yè)原料。尤其是不飽和脂肪酸，隨著人們對其生理功效(降血酯、降糖、健腦、益智等)的深入了解，尋求富含不飽和脂肪酸的新油源，以彌補動植物油源的不足成為當前的研究熱點。傳統(tǒng)的食用油脂主要是來源于動、植物的油脂。在當今人口快速增長，能源日益減少的情況下，食用油脂呈現(xiàn)出價格不斷上漲甚至供不應求的局面。針對這一情況，科學工作者正利用生物技術手段，從各種環(huán)境中篩選能夠產生油脂的微生物并利用發(fā)酵工程，把使用價值較低的農副產品和食品工業(yè)的廢棄物轉化為食用油脂的研究，為食用油脂的來源開辟了一條新的途經。研究過程中，如何篩選出油脂高產的微生物菌株并分類鑒定，無疑是實現(xiàn)工業(yè)化需要解決的首要問題，從蔬菜中篩選產油脂內生真菌并確定其種屬地位，通過研究與比較菌株的特性與代謝產物的安全性，并對菌株的培養(yǎng)基成分與發(fā)酵條件進行優(yōu)化以提高產量，就能預菌株是否具有的實際應用價值，而且，微生物細胞增殖快，生產周期短，生長所需的原料豐富，價格便宜，食品工業(yè)和農業(yè)廢棄物都可以利用，從而降低成本并降低污染，具有可持續(xù)發(fā)展的優(yōu)點。用微生物方法生產食用油脂，不受季節(jié)和氣候變化的限制，能連續(xù)大規(guī)模生產，生產成本低，可以利用微生物細胞融合和細胞誘變等高科技方法，使微生物合成生產出比動、植物油脂更符合人體需要的高營養(yǎng)食用油脂或具有某些特定脂肪酸的油脂，應用前景十分廣闊。?

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一株產油內生真菌Salicorn5。?

本發(fā)明的另一目的是提供該產油內生真菌Salicorn5的應用。?

本發(fā)明的目的可通過以下技術方案實現(xiàn)：?

一株產油內生真菌Salicorn5，經鑒定為新種，命名為畢士海篷子小克銀漢霉（Cunninghamella.bigelovii），保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏日期為2013年9月2日，保藏號為CGMCC?No.8094。?

所述的產油內生真菌Salicorn5在制備不飽和油脂和甾醇中的應用。?

所述的不飽和油脂包括油酸（I）、亞油酸（II），γ-亞麻酸（III）、2,3-二羥基油酸丙酯（IV）、2,3-二羥基硬脂酸丙酯（V）、二油酸酯（VI）、3-羥基-1，2-二油酸丙酯（VII），1,3-二油酸-2-硬脂酸甘油酯（VIII）中的任意一種或多種；所述的甾醇包括過氧化麥角甾醇（IX）、22，23-二烯-3β,5α,6α-三羥基-甾醇（X）、豆甾醇（XI）或麥角甾醇（XII）中的一種或多種。所述的不飽和油脂和甾醇結構如下所示：?

化合物的提取分離?

將目的菌株Salicorn5（CGMCC?No.8094）接種到含400mL液體培養(yǎng)基的1000mL三角瓶中，靜置培養(yǎng)1個月，共發(fā)酵5L。發(fā)酵液經布氏漏斗過濾得到菌絲體和發(fā)酵液，菌絲體用高速勻漿器勻漿后，用丙酮-水(8:2)溶液浸提22～25h，減壓濃縮至不含丙酮，得到丙酮提取物，再用等量的乙酸乙酯萃取三次，得到乙酸乙酯提取液；發(fā)酵液用等量的乙酸乙酯萃取三次得到又一乙酸乙酯提取液，合并兩次乙酸乙酯提取液，減壓濃縮至干，得到富含多不飽和脂肪酸的和甾醇的粗油萃取物，共110g。所述的液體培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200g·L^-1，麥芽糖20g·L^-1，甘露醇20g·L^-1，葡萄糖10g·L^-1，味精5g·L^-1，蛋白胨5g·L^-1，酵母膏3g·L^-1，氯化鈉3g·L^-1，pH為7.0。?