[發明專利]一種細胞內表達花生過敏原的重組乳酸乳球菌及其應用

無效

• 申請號: 201310648469.1
• 申請日: 2013-12-04
• 公開（公告）號: CN103642746A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 張秋香;陳衛;任晟誠;王剛;田豐偉;劉小鳴;趙國忠;趙建新;張灝;郭敏
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/74;A61K48/00;A61K39/35;A61P37/08;C12R1/01
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所 11305
• 代理人: 呂世靜

1.一種能在細胞內重組表達花生過敏原nArah2的重組乳酸乳球菌菌株，其特征在于，所述菌株為Lactococcus?lactis?NZNH，于2013年9月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號,中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC?No.8216。

2.包含權利要求1所述的重組乳酸乳球菌菌株的疫苗，其特征在于，所述疫苗為口服制劑。

3.根據權利要求2所述的包含重組乳酸乳球菌菌株的疫苗，其特征在于，所述口服制劑為膠囊劑、錠劑、粉劑、錠劑或顆粒劑。

4.權利要求1所述的重組乳酸乳球菌菌株在制備可用于治療花生過敏的乳酸乳球菌疫苗中的用途。

5.一種制備權利要求1所述的重組乳酸乳球菌菌株的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：

a)對花生過敏原Arah2的天然基因序列進行密碼子優化以得到優化基因nArah2，如SEQ?No.2所示；

b)利用優化基因nArah2進一步構建胞內表達載體質粒PNZ1；

c)利用重組表達質粒轉化乳酸乳球菌并篩選鑒定獲取重組乳酸乳球菌菌株。

6.根據權利要求5所述的制備重組乳酸乳球菌菌株的方法，其特征在于步驟b）中構建重組表達質粒PNZ1時包括以質粒pUC57-nArah2為模板，利用引物Pra1F5'-CATGCCATGGGTCAACAATGGGAATTACAAG-3'和Pra1R：5'-CGGGGTACCTTAATAACGATCACGACCAC-3'對nArah2基因進行PCR擴增的步驟。

7.根據權利要求6所述的制備重組乳酸乳球菌菌株的方法，其特征在于步驟c）中的轉化方法是電轉化。