[發明專利]一種口服重組酵母及其介導的靶向腸道DC呈遞shRNA的應用

有效

• 申請號: 201310647359.3
• 申請日: 2013-12-02
• 公開（公告）號: CN103695327A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 張智英;張龍;邵斯旻;徐坤;李欣憶;徐華榮
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/865
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

1.一種口服重組酵母，其特征在于，以酵母菌株作為宿主細胞，宿主細胞中轉染有shRNA干擾載體，該shRNA干擾載體上設有hU6啟動子-shRNA-miR30的元件排列。

2.如權利要求1所述的口服重組酵母，其特征在于，所述的shRNA干擾載體上設有hU6-shRNA-miR30的元件排列，其中shRNA的序列為SEQ.ID.NO.1～SEQ.ID.NO.3所示的一種或幾種。

3.如權利要求2所述的口服重組酵母，其特征在于，所述的hU6的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.4所示，miR30的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.5所示。

4.如權利要求1或3所述的口服重組酵母，其特征在于，所述的shRNA干擾載體為JMB84-hU6-shRNA-miR30載體，該載體是將hU6啟動子克隆到載體JMB84上得到JMB84-hU6，再將miR30克隆到JMB84-hU6中hU6的下游得到JMB84-hU6-miR30載體，然后將shRNA干擾序列克隆到JMB84-hU6-miR30中的miR30之間得到JMB84-hU6-shRNA-miR30。

5.如權利要求1所述的口服重組酵母，其特征在于，所述的宿主細胞為酵母菌株JMY1[MATα,his3-Δ1?trp1-289?rad1-Δura3-52]，shRNA干擾載體通過LiAc的方法轉染到宿主細胞中。

6.權利要求1所述的口服重組酵母在制備靶向腸道樹突狀細胞呈遞shRNA的制劑中的應用。

7.權利要求2所述的口服重組酵母在制備靶向腸道樹突狀細胞呈遞shRNA并抑制其CD40蛋白表達量的制劑中的應用。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于，該制劑為增加細胞因子表達量的制劑，所述的細胞因子包括IL-2,IL-6,IL-10,IL-12,TNF-α和INF-γ。

9.權利要求1所述的口服重組酵母在向腸道樹突狀細胞呈遞shRNA中的應用。