[發明專利]一種脂肪乳劑及其制備方法及其應用及方法、以及一種血栓形成前狀態動物模型

在審

• 申請號: 201310639837.6
• 申請日: 2013-12-03
• 公開（公告）號: CN103860594A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 馬建林
• 申請（專利權）人: 馬建林
• 主分類號: A61K35/12
• 分類號: A61K35/12;A61K9/107;A01K67/027;A61K31/575;A61K31/505
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

1.一種脂肪乳劑，其特征在于，包括：膽固醇、豬油、膽酸鈉、丙基硫氧嘧啶、吐溫80、丙二醇和水。

2.如權利要求1中所述脂肪乳劑，其特征在于：主要組分的濃度為，膽固醇100g/L，豬油200g/L，膽酸鈉20g/L，丙基硫氧嘧啶10g/L。

3.如權利要求1或2中所述脂肪乳劑的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

a、取80份豬油至容器中，加熱至融化；

b、繼續加入40份膽固醇并使之融化；

c、繼續加入8份膽酸鈉和4份丙基硫氧嘧啶，攪勻；

d、加入水、84-88份吐溫80和83-84份丙二醇，攪勻；

e、繼續加入水至主要組分達到設定的濃度。

4.如權利要求1或2中所述脂肪乳劑的在建立家兔血栓形成前狀態動物模型中的應用。

5.如權利要求4中所述脂肪乳劑在建立家兔血栓形成前狀態動物模型的應用，其特征在于：包括以下步驟：

1）家兔除給予普通飼料150g/只/天喂養外，還取所述脂肪乳劑按照2ml/kg·ｄ進行灌胃，每天一次，持續兩周；

2）灌胃前后分別從耳中央動脈采血6ml，然后分別進行如下操作：

2.1）取其中3ml用20g/L?EDTA-Na₂抗凝，2500r/min離心5min，取血漿低溫冰箱保存，取部分紅細胞測定：膜流動性（M-Flu）、E-MDA和E-SOD含量；

2.2）將剩下的紅細胞測定M-TC含量；

2.3）取血漿放兔法測定TXB₂、6-Keto-PGF₁、ET、GMP-140、t-PA、PAI；

2.4）另采3ml直接離心測定血清TC、TG、APOAI、APOB、SOD；

2.5）另取部分動脈血測定PAF含量；

2.6）灌胃兩周后處死動物做肉眼及光鏡觀察；

3）將灌胃前后測定的各項指標進行對比和分析。

6.如權利要求5中所述脂肪乳劑在建立家兔血栓形成前狀態動物模型的應用，其特征在于：步驟2.1中，膜流動性（M-Flu）采用如下方法進行測定：

用PBS洗滌紅血球2次配成4*10⁷細胞/ml濃度的紅細胞懸液，按照1:1與DPH（熒光探針）標記液混勻，于25℃保溫30min，離心棄去標記殘液，用PBS洗滌細胞2次，再用PBS稀釋成2ml懸液，在25℃下采用熒光光度計分別測定與激發偏振光振動方向平行、垂直時熒光偏振強度，根據公式計算出M-Flu。

7.如權利要求5中所述脂肪乳劑在建立家兔血栓形成前狀態動物模型的應用，其特征在于：步驟2.2中，采用如下方法進行測定：

將剩下的紅細胞用生理鹽水洗滌后，溶于0.25nmol/L的CaCl₂溶液中，于4℃置30min至完全溶血，然后以1400r/min離心10min，去掉溶血液，沉淀物用PH值為7.4的0.01mmol/L磷酸鹽緩沖液反復洗滌，再按所取的細胞體積加入50g/L氯化鈉，先在超聲波絞碎儀上超生勻漿再用500r/min的速度離心5min，以上清液10um測定紅細胞M-TC含量。

8.一種血栓形成前狀態動物模型，其特征在于：通過如下方法制備形成：給予家兔普通飼料150g/只/天喂養，并采用權利要求1或2中所述脂肪乳劑，按照2ml/kg·ｄ進行灌胃，每天一次，持續兩周制備形成。