[發明專利]一種快速檢測牛鸚鵡熱嗜衣原體的方法

在審

• 申請號: 201310638514.5
• 申請日: 2013-11-27
• 公開（公告）號: CN103981252A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 梁小軍;馬吉鋒;王建東
• 申請（專利權）人: 寧夏農林科學院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種特異、敏感、快速檢測鸚鵡熱嗜衣原體的TaqMan?MGB探針實時熒光定量PCR的方法，涉及的引物如下：根據GenBank中牛鸚鵡熱衣原體主要外膜A蛋白ompA基因序列，利用Primer5.0軟件設計引物，上游序列為5′-GGCACCATGTGGGAAGGTGCTTG-3′，下游序列為5′-GTCATTT?GGAGAGGATCCTGTG-3′，針對引物之間的基因片段利用Primer?Express設計TaqMAN探針，序列為5′-GCGCAGGATACTACGGAGATTATG-3′，5’：端標記FAM，3’端標記NFQ-MGB，擴增目標片段的長度為180bp。

2.如權利要求1所述，涉及快速檢測鸚鵡熱嗜衣原體的TaqMan?MGB探針實時熒光定量PCR的試劑盒。

3.如權利要求2所述快速檢測鸚鵡熱嗜衣原體的TaqMan?MGB探針實時熒光定量PCR的試劑盒研發，涉及的主要PCR方法：Premix?Ex?Taq^TM(Probe?qPCR)10.0μL；PCR?Forward?Primer(10uM)0.8μL；PCR?Reverse?Primer(10uM)0.8μL；Probe1.0μL；總DNA2.0μL；ddH2O5.4μL；總體系20μL。反應條件為95℃預變性30s；95℃5s，62℃20s，72℃20s，40個循環；最后37℃降溫20min，至反應結束。