[發明專利]高效純化量子點與IgG類單克隆抗體偶聯物的方法

有效

• 申請號: 201310637480.8
• 申請日: 2013-12-03
• 公開（公告）號: CN103665159A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 熊勇華;許恒毅;羅薇;許楊;魏華;徐威
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C07K16/14
• 分類號: C07K16/14;C07K16/44;C07K16/12;C07K1/13
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 施秀瑾

1.純化量子點與IgG類單克隆抗體偶聯物的方法，其特征在于包括如下步驟：（1）將水溶性羧基修飾的量子點活化，加入IgG類單克隆抗體溶液，調整溶液pH至7.0～9.0后，偶聯反應；（2）偶聯反應結束后，溶液中加入氨基葡萄糖封閉偶聯產物中量子點表面殘留的羧基，將反應溶液pH值調整至弱酸性；（3）高速離心，棄上清液，取沉淀。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟（3）后，還有將沉淀用含25%甘油，0.01%?NaN₃的0.05?mol/L?pH?7.0～7.5磷酸鹽緩沖液溶解步驟。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所用量子點為羧基化兩親聚合物修飾的水溶性羧基量子點。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（1）中活化為將水溶性羧基修飾的量子點溶解于pH?5.0～6.0，0.05?mol/L硼酸鹽緩沖液中，分別加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺以及N-羥基硫代琥珀酰亞胺，37℃反應2小時，活化量子點羧基。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺以及N-羥基硫代琥珀酰亞胺與量子點的摩爾比均為100～200：1，優選為150:1；所述IgG類單克隆抗體與量子點的摩爾比為1～10：1。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于偶聯反應結束后，溶液中加入氨基葡萄糖至氨基葡萄糖終濃度為1.5～3%，充分混勻15～30分鐘。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟（2）中將反應溶液pH值調整至弱酸性為將pH值調整至4.5～5.0，優選為4.5。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟（3）所述高速離心離心力為28，000～30，000g。

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述IgG類單克隆抗體為抗黃曲霉毒素B₁單克隆抗體、抗赭曲霉毒素單克隆抗體、抗玉米赤霉烯酮單克隆抗體、抗恩諾沙星單克隆抗體、抗鹽酸克倫特羅單克隆抗體、抗沙丁胺醇單克隆抗體、抗孔雀石綠單克隆抗體、抗萊克多巴胺單克隆抗體、抗沙門氏菌單克隆抗體、抗志賀氏菌單克隆抗體、或抗空腸彎曲菌單克隆抗體。