[發(fā)明專利]一種垂花蕙蘭的組培快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310634412.6
• 申請日: 2013-11-29
• 公開（公告）號(hào): CN103609452A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳建中;孫慶俊;張海洋;李百健
• 申請（專利權(quán)）人: 陳建中
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 袁彩君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種垂花蕙蘭的組培快繁方法。

背景技術(shù)

蘭花的經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高，其中多數(shù)種是著名觀賞花卉和名貴藥用植物；垂花蕙蘭在國內(nèi)面世后，更顯王者氣象，連續(xù)多年在廣州花王評(píng)選中當(dāng)選為花王。目前國內(nèi)外除育種研究外，大多數(shù)商業(yè)化蘭花繁殖均采用組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行。蘭花的組織培養(yǎng)自20世紀(jì)60年代發(fā)展至今，已得到了長足的發(fā)展，建立了較為完善的技術(shù)體系，但較高的培養(yǎng)基成本和較長的組培周期極大地影響了蘭花組培苗的利潤空間。

樹皮是加工木材時(shí)產(chǎn)生的有機(jī)廢棄物，來源廣泛，成本較低。目前國內(nèi)外一些蘭花如大花蕙蘭和鐵皮石斛等的栽培主要以松樹皮為基質(zhì)，樹皮基質(zhì)的特點(diǎn)是重量輕、有機(jī)質(zhì)含量高、保水性較好、透氣性強(qiáng)和具有較高的陽離子交換量，樹皮還可提供植物生長所需的微量元素。陳卿然等（2013）報(bào)道發(fā)酵處理后的松樹皮更有利于大花蕙蘭的栽培，因?yàn)樾迈r的松樹皮中有較多的酚類物質(zhì)和較高的C/N比。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種垂花蕙蘭的組培快繁方法，以建立一個(gè)低廉高效的垂花蕙蘭組培快繁技術(shù)體系。

本發(fā)明解決所述技術(shù)問題的方案是：一種垂花蕙蘭的組培快繁方法，包括如下步驟，

（1）垂花蕙蘭原球莖的誘導(dǎo)形成：培養(yǎng)基質(zhì)為40%松樹皮+60%培養(yǎng)基；其中培養(yǎng)基為1/2MS基本培養(yǎng)基，白糖30g/L，瓊脂5～8g/L，pH5.6；培養(yǎng)基質(zhì)在121℃、1.1kg/cm²下滅菌18min；剖開消毒好的蒴果，把種子撒到無菌水中，搖勻，然后接種至培養(yǎng)基質(zhì)上；培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

（2）垂花蕙蘭原球莖的增殖培養(yǎng)：培養(yǎng)基質(zhì)為40%松樹皮+60%培養(yǎng)基；培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA1.0～2.0mg/L+NAA0.3～0.8mg/L+KT0.3～0.8mg/L+50g/L?CW(椰乳)；1/2MS為基本培養(yǎng)基，白糖20g/L，瓊脂5～8g/L，pH5.6；培養(yǎng)基質(zhì)在121℃、1.1kg/cm²下滅菌18min；取已誘導(dǎo)出的原球莖，接種于增殖培養(yǎng)基上；培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

（3）垂花蕙蘭原球莖分化和壯苗生根：培養(yǎng)基質(zhì)為40%松樹皮+60%培養(yǎng)基；培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA0.5～1.2mg/L+NAA0.1～0.3mg/L+100g/L?PJ(馬鈴薯汁)；1/2MS為基本培養(yǎng)基，白糖20g/L，瓊脂5～8g/L，pH5.6；培養(yǎng)基質(zhì)在121℃、1.1kg/cm²下滅菌18min；將增殖培養(yǎng)的原球莖接種于分化和壯苗生根培養(yǎng)基上；培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為1500～2000Lx，光暗周期比為12h:12h；

（4）垂花蕙蘭試管苗的馴化和移栽：將垂花蕙蘭生根試管苗從培養(yǎng)室移至塑料大棚放置3～5d后，去瓶蓋煉苗3～5d，然后從瓶內(nèi)取出垂花蕙蘭幼苗，用水輕輕洗去培養(yǎng)基，將待栽的垂花蕙蘭幼苗根部用0.1%多菌靈處理10s后，將幼苗移栽入穴盤中的栽培基質(zhì)內(nèi)，覆膜保濕5～7d，其間每天通風(fēng)透氣5～15min兩次，視光照強(qiáng)度適當(dāng)加蓋遮陽網(wǎng)，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，噴施1000倍液的甲基托布津，此后進(jìn)行正常的栽培管理。

作為改進(jìn)，所述步驟（1）中蒴果的消毒方法為：取未開裂的垂花蕙蘭蒴果，先用70%～75%乙醇處理1～1.5min后，再蘸95%乙醇在酒精燈火焰上灼燒2～3次。

作為改進(jìn)，所述步驟（4）中栽培基質(zhì)由松樹皮和珍珠巖按體積比1：1配制而成。

本發(fā)明在垂花蕙蘭原球莖的誘導(dǎo)形成、原球莖增殖、原球莖分化和生根壯苗階段的培養(yǎng)基中添加了40%松樹皮，而現(xiàn)有研究中松樹皮一般只在組培苗的馴化移栽過程中使用；培養(yǎng)基質(zhì)經(jīng)高溫高壓滅菌、冷凝后，松樹皮沉于底部，培養(yǎng)基位于上部，大大節(jié)約了培養(yǎng)基的用量，而且實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)效果優(yōu)于普通的培養(yǎng)基；原球莖增殖后使用一次性成苗技術(shù)進(jìn)行原球莖分化和壯苗生根，簡化了生產(chǎn)程序，縮短了成苗時(shí)間；馴化移栽階段利用50%松樹皮+50%珍珠巖為基質(zhì)對(duì)垂花蕙蘭組培苗進(jìn)行假植煉苗，移栽成活率高達(dá)98%，建立了低廉高效的垂花蕙蘭組培快繁技術(shù)體系。該體系與常規(guī)蘭花組培方法相比，可縮短周期時(shí)長25%，節(jié)約成本35%，適用于工廠化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種垂花蕙蘭的組培快繁方法，包括如下步驟：