[發明專利]一種乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法無效
| 申請號： | 201310631973.0 | 申請日： | 2013-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN103627637A | 公開（公告）日： | 2014-03-12 |
| 發明（設計）人： | 韓燁;洪小迪;譚茜倩;周志江 | 申請（專利權）人： | 天津大學 |
| 主分類號： | C12N1/04 | 分類號： | C12N1/04 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 宋潔瑾 |
| 地址： | 300072*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 乳酸 球菌 菌株 冷凍 干燥 制劑 制備 方法 | ||
1.一種乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）活化乳酸片球菌PA003菌種于液體MRS培養基中，利用生長培養基進行培養，使其活性及存活性最佳；
（2）利用冷凍離心機離心法收集菌體，洗滌后，將菌體懸浮于已滅菌的冷凍干燥保護劑培養基中，通過逐步冷凍法將溶液冷凍，待其結冰后準備進行冷凍干燥；
（3）將結冰樣品放置于冷凍干燥機中進行冷凍干燥；最后獲得的冷凍干燥制劑密封避光放置于室溫下貯藏。
2.根據權利要求1所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中生長培養基為10%(w/v)脫脂奶作為溶液基質的MRS-葡萄糖-果糖-蔗糖培養基。
3.根據權利要求2所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述MRS-葡萄糖-果糖-蔗糖培養基配方是指將葡萄糖0.66%，果糖0.66%，蔗糖0.66%代替MRS培養基配方的葡萄糖2%。
4.根據權利要求1所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中接種量為1%，培養溫度37℃，培養時間14h。
5.根據權利要求1所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）冷凍干燥保護劑培養基為5%蔗糖的10%(w/v)脫脂奶溶液。
6.根據權利要求1所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）冷凍離心機轉速10000rpm，在4℃下離心10min。
7.根據權利要求1所述乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）冷凍干燥溫度-53℃，冷凍干燥時間24h。
8.一種乳酸片球菌菌株冷凍干燥制劑的使用方法，其特征在于，使用時利用生理鹽水作為復性液在22℃下進行復性30min。
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